改良 HE（苏木素-伊红）染色试剂盒说明书
时间：2021-06-02 阅读：1119
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南京信帆生物技术有限公司 -
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改良 HE（苏木素-伊红）染色试剂盒
规格：4×10ml/4×100ml
产品内容 1121-10 1121-100
苏木素染液 10ml 100ml
分化液 10ml 100ml
返蓝液 10ml 100ml
伊红染液 10ml 100ml
注意：环境温度低时，返蓝液可能会有结晶析出，将分化液 37℃水浴融化 10min 后，吸取上清即可。
产品说明：
苏木精-伊红染色法 ( Hematoxylin-Eosin staining )，简称 HE 染色法，是病理学常规制片中基
本的染色方法。苏木精染液为碱性染料，主要使嗜碱性物质如细胞核内的染色质与胞质内的核糖体
着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使嗜酸性的细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
染色过程需要根据具体实验样本进行优化，着色情况的不同与组织或细胞的种类不同有关，也
随其生活周期及病理变化而改变。例如，很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当
其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变
深。本产品所包含试剂均为工作液，可直接使用。新型试剂盒相比常规的，伊红和苏木素着色时间
更短，颜色对比更鲜亮。
操作说明（以下步骤仅供参考）：
（一）石蜡组织切片染色
1、取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，切片。
2、石蜡切片脱蜡水化：
1
二甲苯（Ⅰ）脱蜡 10 min。
2
二甲苯（Ⅱ）脱蜡 10 min。
3
无水乙醇（Ⅰ） 2 min。
4
无水乙醇（Ⅱ） 2 min。
5
95%乙醇 2 min。
6
80%乙醇 2 min。
7
70%乙醇 2 min。
8
蒸馏水 2 min。
3、苏木素染液染色 3-10min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，自来水冲洗 5-10s。
4、分化液分化 1-5s，自来水冲洗 20-30s，洗掉分化液即可。
5、返蓝液返蓝 10s-1min，自来水冲洗 20-30s，洗掉返蓝液即可。
6、伊红染色 30s-2min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，自来水冲洗 1-5s。
7、脱水、透明、封片。
①80%乙醇（Ⅰ） 2-3s
产品内容
1121-10
1121-100
苏木素染液 10ml 100ml
分化液 10ml 100ml
返蓝液 10ml 100ml
伊红染液 10ml 100ml第 2页，共 2 页
②90%乙醇（Ⅱ） 2-3s
③95%乙醇（Ⅰ） 2-3s
④95%乙醇（Ⅱ） 2-3s
⑤无水乙醇（Ⅰ） 2-3s
⑥无水乙醇（Ⅱ） 1min
⑦二甲苯（Ⅰ） 1min
⑧二甲苯（Ⅱ） 1min
⑨中性树胶封固，镜下观察。
（二）冰冻切片或细胞染色
1. 冰冻切片恢复室温后直接固定 3-5min，水洗 3-5min。
2. 苏木素染色 1-2min。
3. 分化液分化 10s，水洗 1-2min。
4. 返蓝液反蓝 2-5min，水洗 1-2min。
5. 伊红染色 30s-2min，自来水稍洗。
6. 脱水，透明，封片：
1
95％乙醇（Ⅰ） 2-3s。
2
95％乙醇（Ⅱ） 2-3s。
3
100％乙醇（Ⅰ）2-3s。
4
100％乙醇（Ⅱ）1min。
5
二甲苯（Ⅰ） 1min。
6
二甲苯（Ⅱ） 1min。
7
中性树胶封固，镜下观察。
染色结果：
细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。
注意事项：
1. 切片脱蜡应尽量干净。
2. 系列乙醇应经常更换新液。
3. 第一次使用本试剂盒时建议先取 1-2 个样品做预实验。
4. 染色过程推荐浅染，通常只需能够分辨细胞核即可，颜色过深有可能影响细胞质颜色。
5. 分化液的分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和盐酸乙醇分化液的新旧而定，另外分化后
自来水冲洗时间应该足够，以便*清洗酸。
6. 冷冻切片染色时间尽量要短。
7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。