上海信帆供应:土壤硝酸还原酶试剂盒，现货供应，提供技术咨询
时间：2014-10-09 阅读：1508
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土壤硝酸还原酶（Solid-Nitrate Reductase，S-NR）试剂盒说明书
测定意义
S-NR催化土壤中硝酸盐还原为亚硝酸盐，是土壤硝态氮还原的关键酶。研究S-NR的活性对合理施肥，降低氮素的损失具有重要意义。
测定原理
S-NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋ +H 2 O；产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下，与对–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成红色偶氮化合物；生成的红色偶氮化合物在 540 nm 有zui大吸收峰，可用分光光度法测定。
土壤硝酸还原酶试剂盒
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
试剂一：液体20mL×1瓶，-20℃保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，-20℃保存。
试剂三：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂五：标准品储备液1mL，-20℃保存。
0.1mmol/L的NaNO2标准液的配制：用时将试剂五稀释100倍，即取 0.1ml 加蒸馏水定容至 10ml。
测定操作表
试剂名称 | 1mL带盖离心管 | |||
测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 | |
风干土样（g） | 0.1 | 0.1 |
|
|
0.1mmol/LNaNO2（μL） |
|
| 100 |
|
双蒸水（μL） |
| 500 |
| 100 |
试剂一（μL） | 375 |
| 375 | 375 |
试剂二（μL） | 125 |
| 125 | 125 |
混匀后，盖盖后37℃水浴60min，8000g室温离心10min，取上清液
上清液（μL） | 400 | 400 | 400 | 400 |
试剂三（μL） | 250 | 250 | 250 | 250 |
试剂四（μL） | 250 | 250 | 250 | 250 |
混匀，显色20min后，4000g，室温离心10min，用蒸馏水调零，540nm下读取各管吸光值
注意事项
1、试剂一、试剂二和试剂五在冰上放置，用完立即放回-20℃。
2、标准管和空白管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
S-NR活性计算：
单位的定义：24h每g土样中产生1μmol NO2ˉ的量为一个 S-NR活力单位。
S-NR（U/g）=标准品浓度（0.1mmol/L）×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）÷反应时间（1/24h）×反应总体积（0.5mL）÷样本质量（0.1g）=12×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）
土壤硝酸还原酶试剂盒