考马斯亮蓝 G250 染料试剂操作步骤
时间:2023-11-08 阅读:662
【产品名称】 :考马斯亮蓝 G250 染料试剂
【产品规格】 :500ml
【储存条件】 :常温密封
【有效期】 :12 个月
【背景介绍】 :
考马斯亮蓝 G250 染料试剂由考马斯亮蓝 G250、乙醇、磷酸等组成,用于考马斯
染料结合(Bradford)分析的总蛋白测量,其特点在于对蛋白样品中可能存在的大
多数盐、溶剂、缓冲液、硫醇、金属螯合剂、还原性物质等均不排斥,检测浓度
下限达到 25μg/ml,最小检测蛋白量达到 0.5μg,待测样品体积为 1~20μl,
在 50~1000μg/ml 浓度范围内有较好的线性关系。
【自备材料】:
1、酶标仪或分光光度计 2、蒸馏水 3、96 孔板或比色杯
【操作步骤(仅供参考)】:
1、稀释蛋白标准(一般为 BSA5mg/ml)使其终浓度为 0.5mg/ml。注意:蛋白样品
在什么溶液中,蛋白标准也应用什么溶液稀释,也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀释
蛋白标准。
2、将标准品按 0,1,2,4,8,12,16,20μl 加到 96 孔板的蛋白标准孔中,加蛋白标准稀
释液补足至 20μl。
3、加适当体积样品到 96 孔板的样品孔中,补加标准品稀释液至 20μl。
4、各孔加入 200μl 考马斯亮蓝 G250 染料试剂,室温放置 3~5min。
5、酶标仪测定 595nm 波长处的吸光值,560~610nm 之间的波长也可。
6、根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
【注意事项】:
1、本产品仅供科研实验用,不做其它用途。
2、为了您的安全与健康,实验时请穿实验服并佩戴一次性手套