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ELISA试剂盒研究方法

时间:2014-05-22      阅读:918

    近年来,酶联免疫ELISA试剂盒试剂盒国家科技迅猛发展,取的了可喜的成绩,过去有很长一段时间有人用电泳证明血清中抗体活性在γ球蛋白部分,故曾把抗体统称为两种(γ)球蛋白。后来发现,抗体并不都在γ区;并且位于γ区的球蛋白,也不一定都具有抗体活性。ELISA试剂盒以含铁的磁性微粒作为ELISA试剂盒固相载体,反应后用磁铁的吸引进行分离,洗涤利便,ELISA试剂盒一般均配以特殊仪器。为比较不同固相在某一ELISA试剂盒测定中的优劣,可应用如下的试验:用其他免疫学测定方法选出一个典型的阳性标本和阴性标本,将它们进行一系列稀释后,在不同的固相载体上按预定的ELISA试剂盒操纵步骤进行测定,然后比较结果。

 在ELISA试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:

  1.固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板

  2.包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。

  3.酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA试剂盒法进行初步效价的滴定。

  4.酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。

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