搜集ELISA样本前的完好的方案
时间:2021-05-24 阅读:465
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在搜集样本前都必须有一个完好的方案,必须清楚要检测的成份是否满足安稳。对搜集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。关于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,-70℃冻存备用。研域生物提示,标本应防止重复冻融。
液体类标本: 包含血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培育上清等。
1. 血清:
室温血液天然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清。保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
2. 血浆:
应根据标本的要求挑选edta、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清。保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
3. 尿液:
用无菌管搜集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清。保存过程中如有沉积构成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实施。
4. 细胞培育上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管搜集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清。
5. 培育细胞
检测细胞内的成份时,用pbs(ph7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度到达100万/ml左右。经过重复冻融或参加安排蛋白萃取试剂,以使细胞损坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清。保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
6. 安排标本
切割标本后,称取分量。参加一定量的pbs,ph7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本消融后依然坚持2-8℃的温度。参加一定量的pbs(ph7.4),或安排蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心搜集上清。分装后一份待检测,其他冷冻备用。