ELISA试剂盒之DIY夹心法技术方针
时间:2019-12-02 阅读:420
ELISA试剂盒之DIY夹心法技术方针:
选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对;若选择两个单抗,必须识别不同表位的抗体;从同一家公司选择抗体对。
一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
为了优化灵敏度,建议过夜孵育标准品和标本。
若使用过氧化物酶作为显色系统,应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
标准品的配制:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,注意每批的细节。在使用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。
ELISA实验中为了确定*信号和zui低背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时,应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
当测定混合液体中的抗原时,如血清,建议在标本稀释液中加不相干的Ig。
本公司提供各种种属各种系列ELISA检测试剂盒,主要用于科研方面,不用于临床诊断。可以用于检测各种指标。ELISA试剂盒本司提供实验代测服务,详情请登入我司查询。