生物实验中培养细胞的步骤至关重要，江苏晶美生物科技的研究人员通过每次的实验总结出培养细胞常用的固定剂和固定方法。常用的培养细胞常用固定剂有4％多聚甲醛磷酸缓冲液、丙酮、甲醇和95％乙醇。在固定之前需用37℃预热的PBS轻洗细胞。

    1．4％多聚甲醛磷酸缓冲液  固定10―20分钟，干燥。

    2．甲醇  10‰甲醇固定5―20分钟，自然干燥。

    3．丙酮  4℃冷丙酮固定组织穿透性和脱水性强，抗原保存好，很少用于组织切片，常用于培养细胞和细胞涂片的固定，平时丙酮4℃低温保存备用，临用时，将载玻片插入冷丙酮内5～10分钟，取出后自然于燥。

    4．乙醇  95％乙醇脱水性强，易引起组织收缩、变硬，影响切片质量，因而固定时间不宜过长(2小时内)。乙醇使蛋白变性程度轻，固定后蛋白 可再溶解，在染色中孵育时间长的情况下，抗原可流失，并减弱反应强度。

    5．三氯甲烷与乙醇等量混合对组织穿透性*，即使涂片上含较多的黏液，固定效果仍较好，是理想的细胞固定液。

    培养细胞固定之后晾干可使细胞牢固地黏附在载玻片上，故对于容易脱落的细胞应延长晾干时间。晾干之后PBS漂洗3次，然后进行组织化学或免疫组织化学染色。

    用于免疫组织化学的固定剂种类很多，不同的抗原和标本均可醛类固定液，如效果不佳，再试用其他固定液。选择*固定液的标准：一是能地保持组织细胞的形态结构；二是zui大限度地保存抗原免疫活性和被检物不被丢失。一些含重金属固定液可用于组织化学标本的固定，但在免疫组织化学染色中禁用。