在用方阵ELISA确定好抗原抗体*结合浓度后就可以做间接竞争ELISA了，其目的主要是考察抗体的特异性、绘制标准曲线，计算抗体对抗原的半数抑制、检测限等参数，小鼠ELISA试剂盒也可以用来检测未知样品中的抗体。方法是用确定的抗原包被，在加一抗时同时加入不同浓度的标准品，然后加二抗，显色。用药物(即标准品)浓度的对数为横坐标、抑制率为纵坐标，绘制ELISA标准曲线，计算相关的参数，之后就可以将未知的样品所测OD值代入曲线方程求其中抗体的含量。通常这是建立ELISA检测方法的*项目。
小鼠ELISA试剂盒检测的四大优点：
1.特异性强：不与其它细胞因子反应。
2.重复性好：板内、板间变异系数均小于10%。
3.稳定性高：实验效果很稳定。
4.超灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品，稀释度和样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
小鼠ELISA试剂盒的评价（evaluation）分两个方面：一是试剂本身的质量评价，符合一定要求后才能出产供给；一是在临床应用中效果的评价。判定试验的可靠性常以其敏捷度及特异性作为考核尺度。 ELISA试剂盒的临床质量评价是用该试剂对临床样本进行检测，以观察实在际应用价值。临床应用的敏捷度用疾病患者试验阳性的百分率表示，特异性以无病者试验阴性的百分率表示。以肝炎ELISA诊断试剂为例，首先必需通过中国药品生物制品检定，以得到出产的许可。