实现常规荧光共聚焦成像和快速光谱成像的结合

随着科研人员需求的不断增加，探测到更多的信号甚至是光谱信息变得越来越必要，尤其在区分颜色比较接近的荧光的时候。创新的A1si激光共聚焦显微镜带给用户的灵活性，高速度以及光谱功能，远远超出常规共聚焦显微镜。配备的常规荧光探测器和光谱探测器，可以满足多种科研领域的应用需求。

单次扫描即可获得320nm带宽的光谱图像
波长分辨率可以是2.5, 5,和 10 nm. 选用10 nm分辨率时, 单次扫描可获得的波长范围高达320 nm，远远超出其他类似系统。

1） 简单，灵活的显微镜控制

只需单击*个图标，即可实现目镜观察和共聚焦拍摄之间的光路切换。通过A1si的系统软件，用户可以轻松控制显微镜的各个部件，将更多的时间用于拍摄图像。

2） 透射光拍摄

在拍摄光谱图像和标准共聚焦图像的同时，A1si还可以拍摄包括DIC，明视场，相差在内的透射光图像，以便在组织和细胞中更*的进行荧光标记的定位。

3） FRAP观察

通过macro程序，可以进行FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching光漂白后的荧光恢复) 实验. 激光**定位到用户的任意区域（圆形，矩形，任意多边形，点，线，甚至环形）进行光漂白。其他FRAP技术，包括iFRAP (interval FRAP) 和FLIP (Fluorescence loss in Photobleaching)同样得到支持。

4） 对光谱图像进行时间动态记录

由于单次拍摄即可得到全光谱图像，所以A1si可以对光谱图像进行动态拍摄。拍摄时间序列的模式有：模式/固定时间间隔模式/用户自定义拍摄时间表模式）

5） 对荧光信号进行光谱拆分，消除串色

A1si 软件可以将不同荧光探针的信号清楚地拆分开，包括光谱接近，大范围重叠的荧光信号（比如CFP, RFP, YFP,和 Alexa488）. 在观察多重荧光染色来定位蛋白分子， FRET 实验时，这个功能非常有用.通过光谱拆分，还可以清除掉自发荧光信号。

6） 高效率的荧光透过技术

荧光光纤和探测器表面都使用了高效防反射涂层，将荧光信号的损失降到**，实现光路的高透过率。

7） 高波长分辨率

通过使用精密设计的衍射光栅，可以实现高达2.5nm的光谱分辨率.此外还有5nm 和 10nm分辨率可选。不同的分辨率可以分别用来拆分光谱重叠的探针或同时对4个或更多的探针进行拍摄。

8） 采用偏光控制技术的光谱探测器

Nikon的DEES (Diffraction Efficiency Enhancement System衍射效率增强系统) **技术可以对偏振光进行控制，从而实现亮度的**化。通过调整偏振光方向，衍射光栅的效率得到**化，从而在从蓝到红的整个可见光范围内提高广谱数据的亮度和线性。

9） 拍摄到真实的荧光颜色

由于采用了新的**矫正技术，而且光谱分辨率和针孔大小无关，A1si可以**探测到光谱信号，得到真实颜色。同其他的伪彩色系统相比，A1si可以实时观察到真彩色的样本。

用 A1si得到的广谱数据和探针制造商提供的数据非常接近。

10） 把对活细胞和组织的影响降到**

通过单次激发*可以得到全光谱图像，因此激光强度和PMT增益的调节变得简单而快速。同时把荧光信号的衰减以及激光对标本的损伤降到**。对于活细胞和组织，A1si是*套“温柔”的系统。

11） 同时拍摄32通道的光谱图像

A1si 采用了32 通道PMT，并革新了多重高速数字转换电路和LVDS(Low Voltage Differential Signal低压差分信号)高速串行传输技术,创造性地实现了单词扫描得到32通道光谱信息，大大减少了拍摄时间，并实现了实时观察。

12） 双积分信号处理

新开发的DISP (Dual Integration Signal Processing双积分信号处理) 技术提高了电子效率，避免了模/数转换过程中荧光信号的损失。整个曝光期间，荧光信号得到全程记录，有效提高了信噪比。