荧光PCR试剂盒产品特点及实验过程假阳性的原因和解决方法总结
时间:2024-10-14 阅读:100
荧光PCR试剂盒产品特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增巴戟天,与其他植物没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. PCR试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
PCR 实验过程假阳性原因及解决方法
现象:空白对照出现条带
可能原因:
1、引物设计不适,与目的序列具有同源性。
2、试剂污染:水、移液枪等被核酸污染。
3、样品间出现交叉污染。
解决方法:
1、实验仪器高压灭菌。
2、实验试剂(酶除外)高压灭菌,离心管枪头一次性使用。
3、规范实验操作。
4、假阳性可通过巢式 PCR 解决,或者使用特异性较高的试剂盒扩增。