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实时荧光定量PCR系统简介
实时荧光定量PCR系统主要用于运行实时荧光定量PCR实验,通过荧光激发和采集的方式,对实验过程进行实时监控,将实验过程数据绘制成荧光曲线,实时呈现于仪器显示界面,并对实验数据进行拟合和分析,最后可生成PDF格式的实验报告。
对取于其他动物体内的生物样本(如血液,体液等)中包含的目标核酸,进行快速精准的定性和定量分析,同时也能够对特殊样本进行标准曲线,熔解曲线,基因分型等分析。
基本原理
实时荧光定量PCR仪器的原理:聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA扩增,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个温度循环周期,使目的基因得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点,是基因扩增技术的一次重大革新。PCR技术可将极微量的目标DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力。
实时荧光定量PCR技术是在常规PCR基础上加入相应的荧光染料或荧光标记探针,在PCR反应过程中通过荧光信号变化,对整个PCR进程进行实时检测,以荧光化学物质监测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法,通过内参或外参的方法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。
实时荧光定量PCR系统应用领域
◆食源性致病菌检测
◆动植物源性检测
◆植物科学与农业生物技术
◆基因突变及多态性
◆基础科学研究
◆水体监测
◆病原核酸检测
◆ 转基因检测
◆动物疫情监测
◆食品卫生检疫
◆海关进出口检疫
仪器基本结构
实时荧光定量PCR系统是实时检测反应的仪器,主要由基因扩增热循环系统、荧光实时检测系统、微电路控制系统、计算机及应用软件组成。其中两个核心功能模块:热循环系统和荧光实时检测系统。其中基因扩增热循环系统工作原理与传统基因扩增仪工作原理基本相同,采用半导体加热制冷工作方式完成热循环过程。荧光检测系统主要有由荧光激发部件、光信号传输部件、荧光检测部件、控制系统组成。
仪器特点:
1、体积小,重量轻,方便携带,兼容0.2PCR单管、八联管;
2、采用美国MARLOW定制型帕尔贴模块高级别半导体芯片,新一代半导体升降温技术,快变温速率可达每秒7度,使用寿命可达一百万次循环;
3、采用的采光检测处理技术,自动调节荧光本底,提高荧光信号灵敏度和信噪比,获得更佳结果;
4、13S四通道快速采光,荧光采集信号稳定,减少延时误差;
5、采用免维护的长寿命LED光源,无需更换,独立荧光通道,不同通道之间的串扰更小;
6、 恒流式控制电路,功率输出平滑,延长 Peltier寿命,提高控温精度;
7、具有过流、过温、掉电数据自恢复等保护功能;
8、强大的软件分析功能,可以进行定量分析,熔解曲线分析,基因分型等,分析软件免费升级,支持不同行业的软件定制。