博精:想要了解荧光分光光度计就要知道这些参数
时间:2023-04-19 阅读:203
想要了解荧光分光光度计就要知道这些参数,检测荧光的仪器:分子荧光光谱仪又称荧光分光光度计有的场合也叫荧光光谱仪,是一种定性、定量分析的仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。
荧光光度法是基态原子吸收光源的能量而变成激发态,激发态原子在去活化过程中将吸收的能量以荧光的形式释放出来,此荧光信号的强弱与样品中待测元素的含量成线性关系,因此通过测量荧光强度就可以确定样品中被测元素的含量。
荧光分光光度计在性能比较时应该注意以下几点:
灵敏度:荧光分光光度计的灵敏度是使用者最在乎的一个指标。灵敏度表明如何获得噪声小且数据平滑的指标,该指标越大,系统越好。它也被称为信噪比。但是灵敏度的测量条件不同,这个指标的数字也不同。若测量条件不一致,如狭缝、响应(时间常量)等,则无法进行不同系统的比较。
光源:除个别案例外,CMF-300 荧光分光光度计一般使用150W氙灯作为光源。无臭氧灯在波长小于220 nm处提供很弱的光,若使用小于220 nm的波长作为激发光则是不可能的。
波长范围:荧光分光光度计的测量波长越宽,应用越广。
狭缝:也称为带宽,它代表在光度计入口和出口处狭缝的宽度。如果狭缝宽度大,则由于光量增加而可以获得具有相对较低噪声(灵敏度高)的数据,但是,无法确定光谱的细微峰值。如果狭缝很窄,则可以确定光谱的细微峰值,但是光量会减少,从而导致数据噪声增加。虽然最终结果主要取决于样品,但是考虑到CMF-300 荧光分光光度计对微量样品分析的灵敏度,没必要缩小狭缝宽度。
响应:如果响应较大,光谱就变得比较平滑,但是光谱形状会变钝。当测量激发、发射光谱时,应该依据扫描速度选择的响应。在一定扫描速度下,如果没有选择合适的响应,即使响应比较小,也有可能增加噪声,使光谱变形。
其他:如三维光谱测量,磷光测量等特殊的测量,可以通过选配软件来实现。一些仪器型号的标准配置也可执行这些测量。