ELISA试剂盒选购经验分享
时间:2021-11-24 阅读:395
ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了广泛的应用,然而实验新手们面对各种各样、动则上上千种的ELISA试剂盒,真的不能分辨是不是自己想要的那个,也不知道应该怎么选择合适的试剂盒。下面小编就为大家介绍一下如何选择可靠又合适的ELISA试剂盒。
1.明确研究种属。一般来说,厂家都会在产品名称上标明种属,且为第一个单词,检索种属的常用语言为英文。如果您需对不同物种的同一因子进行定量,建议优先寻找适用于多个种属的ELISA试剂盒,产品介绍中会注明Multi-species。
2.要明确样本类型。不同厂家验证样本类型不同,即使同一厂家不同试剂盒,其验证样本类型也不尽相同。特别是复杂的血浆样本,根据样本处理方式的差异,分为EDTA血浆、肝素抗凝血浆和柠檬酸盐血浆,因此购买前需仔细核对。(如果您信赖厂家,也可以让厂家推荐,大多数厂家比消费方要更熟悉试剂盒。)
3.要会预测自己的目标因子的浓度。一般来说,待测因子可以根据经验或资料获得参考的检测范围,且正常人与疾病状态存在差异。如热门炎症因子IL-6,正常人血清中浓度为3.13pg/mL,病人会显著增高,CAR-T回输病人血清中的IL-6浓度甚至为正常人的200倍以上。因而,必要时进行样本的稀释及选择合适检测范围的试剂盒极其重要。若浓度太低,可选择高敏试剂盒;若不确定待测浓度或样本间浓度差异较大,建议使用检测动态范围更宽的化学发光法ELISA试剂盒。
如果同样为IL-6ELISA试剂盒,各类型检测范围差异较大,需要根据实际情况选择合适的试剂盒。
4.跟厂家要他们为试剂盒做的质控的相关证明。质控数据在说明书中即可找到,在购买前检查试剂盒是否进行过严格的质控实验,包括批次内(Intra-Assay)及批次间(Inter-Assay)、掺入回收实验、线性稀释实验及交叉反应测试等,每个数据最好都看一下,确保*的结果重现性及准确性。
5.确定需检测的因子数量。如果待测因子超过5个,且样本量较小时,单因子ELISA检测方法并不是*。建议考虑多因子检测方法,如固相芯片(样本数量一般5个以内,检测指标可达上百个)及Luminex液相芯片方法(检测样本多达80个,检测指标多达50个)或微流控ELISA检测系统Ella。可节约样本及时间成本,也可保证检测结果准确。
6.根据您的预算选择产品。不要一味的追求低价,应当在您的预算范围内选择更合适的试剂盒。生物学是极其严谨的科学,一致性的实验结果是基金、文章等评审过程中不可少的因素,即使低廉的价格,不能够重现好的结果,也是资源的另一种浪费。