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人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ)试剂盒操作步骤

时间:2021-06-11      阅读:100

人免疫球蛋白G Fc段受体ⅡFcγRⅡ试剂盒样本处理及操作步骤

样本处理及要求

1.  血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.  细胞培养物上清或其它生物标本1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
 

操作步骤

  1.   从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃
  2.   设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL
  3.   样本孔待测样本50μL;空白孔不加。
  4.   除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min
  5.   弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液350μL,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
  6.   每孔加入底物AB50μL37℃避光孵育15min
  7.   每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

 

 

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