表皮生长因子受体EGFR和HER2配体寡肽厂家

齐岳供应表皮生长因子受体EGFR和HER2配体寡肽厂家

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2020-03-06 13:44:37
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西安齐岳生物科技有限公司

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西安齐岳生物科技有限公司是国内的抗体偶联科研(ADCs)、纳米颗粒、PEG衍生物;支化聚合物生产制造商表皮生长因子受体EGFR和HER2配体寡肽厂家

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表皮生长因子受体EGFR和HER2配体寡肽厂家

西安齐岳生物科技有限公司是国内的抗体偶联科研(ADCs)、纳米颗粒、PEG衍生物;支化聚合物生产制造商;提供的产品有人源化抗P185~(HER-2)单区抗体
Anti-HER2 Fab'修饰包裹素蛋白PE38KDEL的靶向纳米粒
靶向HER2和包裹PE38KDEL的PLGA纳米球
蜂素与基因变构人白细胞介素-2融合基因
针对HER2靶点的抗体科研
2E8-NCTD素
靶向EGFR隐蔽表位的素
表皮生长因子受体EGFR和HER2配体寡肽
Anti-HER3抗体
多聚精氨酸—胞嘧啶脱氨酶融合蛋白
靶向nAChR激动剂和基于骨架迁跃的EGFR/HER-2剂
L型氨基酸转运子1(LAT1)和磷酸化s6(phospho-s6,p-s6)核糖体蛋白
多聚精氨酸—胞嘧啶脱氨酶融合蛋白抗活性
抗SSA/Ro 60kDa抗原表位性单克隆抗体
重组人源抗--CTGF scFv二聚体
抗人CD19分子的嵌合抗原受体
融合基因anti-erbB2 scFv-Fc-CD28-CD3(ζ)
二硫键稳定的抗CD3/抗CD 19 (ds-Diabody)微型双功能抗体
鼠抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9单链抗体
抗CD20单链抗体
anti-PD-1(scFv)/IL-15/IL-15Rα-sushi(简称PD-S15)
鼠抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9单链抗体
抗VWF-A3区性单抗SZ-123单链抗体
抗CPAα素单链抗体基因

 

 

表皮生长因子受体EGFR和HER2配体寡肽厂家产品描述:

表皮生长因子受体EGFR/HER1和HER2/neu都是跨膜受体激酶家族(ErbB)的成员,ErbB受体家族与人类症的关系密切,EGFR和HER2在多种细胞表面异常表达,且ErbB受体发生改变的通常更具有侵袭性,病人也往往预后不良,这使得EGFR和HER2成为抗靶向的靶点。力达霉素(Lidamycin,LDM)是迄今报道过的对细胞杀伤作用强的大分子肽类抗,由辅基蛋白(LDP)和烯二炔结构的发色团(AE)两部分组成,发色团是力达霉素分子的活性部分。的目的是构建一种靶向EGFR和HER2的双性强化融合蛋白(Ec-LDP-Hr-AE),并对其体内外抗活性进行检测。 方法:双性融合蛋白Ec-LDP-Hr的构建主要采用PCR扩增和DNA克隆。pelB信号肽序列、寡肽配体Ec基因序列、寡肽配体Hr基因序列以及(GGGGS)_2连接肽基因序列均采用人工合成的方法得到,并作为PCR引物,经过5轮PCR扩增以及DNA克隆后,得到了融合蛋白基因Ec-ldp-Hr,将该基因经过双酶切后插入到pET30a(+)表达载体中,得到重组表达载体pET-Ec-ldp-Hr。为了进行比较,同时构建了单靶点的重组表达载体pET-Ec-ldp和pET-ldp-Hr。将三种表达载体均转化到大肠杆菌BL21(DE3)star~(TM)中,加入IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白的表达情况。融合蛋白的提取采用渗透压震惊法,使用Ni~(2+)亲和层析法分离纯化融合蛋白,HPLC检测融合蛋白的纯度,Western Blot对纯化出的融合蛋白进行鉴定。融合蛋白与细胞表面EGFR和HER2的亲和活性主要采用了ELISA、细胞荧光化学法、基于流式细胞术的荧光试验、竞争性荧光试验以及共沉淀进行分析。将LDM活性发色团分子(AE)与融合蛋白在体外进行分子组装,得到强化融合蛋白(Ec-LDP-Hr-AE),采用MTT法测定强化融合蛋白对细胞的体外杀伤活性。细胞荧光染色和基于流式细胞术的荧光检测用于分析融合蛋白是否可内吞进入细胞以及检测内吞效率。双性强化融合蛋白Ec-LDP-Hr-AE的体内抗活性采用人SK-OV-3裸鼠移植模型进行评价。结果:经过5轮PCR扩增以及DNA克隆后,得到了融合蛋白基因Ec-ldp-Hr,将其插入到表达载体后成功实现了在大肠杆菌中的表达。Ec-LDP-Hr蛋白和Ec-LDP蛋白主要以可溶性的形式分泌到了大肠杆菌周质腔中,而LDP-Hr蛋白除存在于周质腔中外,还分泌到了培养液上清中。

Ni~(2+)亲和层析对周质腔中的蛋白进行纯化,得到的目的蛋白经HPLC检测纯度均在95%以上。Ec-LDP-Hr、Ec-LDP和LDP-Hr三种融合蛋白的产量分别为每升发酵液得到9 mg、18 mg和60 mg活性蛋白。将纯化的蛋白用Western blot方法进行鉴定,了纯化的蛋白为带有His-tag标签的目的蛋白。ELISA和基于流式细胞术的荧光试验结果显示Ec-LDP-Hr蛋白对EGFR和HER2高表达的细胞系,如A431、SK-BR-3、SK-OV-3、MCF-7均有很强的结合活性,而对不表达EGFR和HER2的NIH 3T3细胞则无亲和活性。细胞荧光化学试验了Ec-LDP-Hr蛋白可以与A431和SK-BR-3细胞表面的受体结合,共沉淀试验则进一步证明了Ec-LDP-Hr蛋白是与A431和SK-BR-3细胞表面的EGFR和HER2结合的;竞争性荧光试验结果显示,Ec-LDP-Hr蛋白可部分抗EGFR和抗HER2抗体与各自抗原的结合能力,表明该蛋白可竞争性的与EGFR和HER2结合。
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