技术资料| 改良吉姆萨染色液(20X)

　　改良吉姆萨染色液(Modified Giemsa Staining Solution)，也称瑞氏-吉姆萨染色液(Wright-Giemsa Staining Solution)，是用于细胞、血液、骨髓涂片或组织切片等样品染色的染色液。根据细胞成分的化学性质，改良吉姆萨染色液可将细胞质染成粉红色或蓝色，将细胞核染成紫红色或蓝紫色。在光学显微镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像，便于对细胞内部结构的观察及异常变化的识别。

　　吉姆萨染色(Giemsa stain)，又称姬姆萨染色，是以德国化学家、细菌学家Gustav Giemsa的名字来命名的，最初是用于疟疾病人体内寄生虫的诊断，后由于对染色质和细胞核膜的高质量染色而用于组织病理学和细胞遗传学。吉姆萨染色对细胞质着色较好，结构显示清晰，但细胞核着色较深，核结构显示不佳。吉姆萨染色原理和结果与瑞氏染色基本相同，而改良吉姆萨染色法是将吉姆萨染色法与瑞氏染色法结合，兼顾二者之长，使细胞质和细胞核均能获得满意的染色效果。改良吉姆萨染色液、吉姆萨染色液和瑞氏染色液三种染色液的比较如下：

　　产品名称改良吉姆萨染色液(20X)吉姆萨染色液(10X)瑞氏染色液

　　产品编号C0131C0133C0135

　　主要成分天青B、天青II-伊红、亚甲基蓝天青II和伊红亚甲基蓝和伊红

　　细胞质颜色粉红色或蓝色粉红色或蓝色粉红色或蓝色

　　细胞核颜色紫红色或蓝紫色紫红色或蓝紫色紫红色

　　特点将吉姆萨染色和瑞氏染色结合起来，弥补了两者各自的缺点对细胞质着色力较强，但细胞核着色较深，细胞核结构显示不佳细胞质及其中颗粒染色较好，但细胞核染色质及核膜的结构不是很清晰

　　用途主要用于细胞、血液、骨髓涂片或组织切片的染色主要用于染色体显带、寄生虫和血细胞的染色主要用于血细胞的染色

　　改良吉姆萨染色液的主要成分是天青B (azure B)、天青II-伊红(azure II-eosin)和亚甲基蓝(methylene blue)。其中天青B是一种碱性染料(阳离子染料)，常用于染色体或核酸的染色;伊红是酸性染料(阴离子染料)，是以氧杂蒽和醌式苯环作为生色基团，以羧基(-COOH)为助色基团的染料;亚甲基蓝是碱性染料(阳离子染料)，生色基团包括偶氮基(-N=N-)等。染色原理是基于在酸性染料中具有染色作用的阴离子与细胞内的碱性物质相结合，而碱性染料中具有染色作用的阳离子与细胞内的酸性物质相结合。各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。细胞核蛋白主要与天青II和伊红形成的化合物结合，使细胞核呈紫红色。各类成分由于自身特性与改良吉姆萨染液中不同物质结合呈现不同颜色从而得以区分。在对其它细胞染色时，代谢旺盛的细胞胞质含较多蛋白质呈酸性，因此与天青II和伊红形成的化合物结合呈粉红色。血细胞在本染色液染色后的细胞质颜色见下表：

　　血细胞类型细胞质颜色

　　成熟红细胞(Mature red blood cells)粉红色

　　嗜酸性粒细胞(Eosinophils)粉红色

　　嗜碱性粒细胞(Basophils)蓝紫色

　　中性粒细胞(Neutrophils)淡紫红色

　　单核细胞(Monocytes)、淋巴细胞(Lymphocytes)蓝紫色或紫红色

　　本产品染色效果好、染色力强、着色清晰。本产品用于HeLa细胞的染色效果参考图1。

　　本产品以无水乙醇为溶剂，与传统的甲醇溶解法相比，提高了使用的安全性。

　　按推荐稀释倍数配制染色工作液(1X)，且每样使用1ml染色工作液(1X)计算，此时本试剂盒的100ml和500ml包装分别可以检测2000个和10000个样品。

　　包装清单：

　　产品编号产品名称包装

　　C0131-100ml改良吉姆萨染色液(20X)100ml

　　C0131-500ml改良吉姆萨染色液(20X)500ml

　　—说明书1份

　　保存条件：

　　室温避光保存，至少两年有效。

　　注意事项：

　　血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色和拍照。

　　本染色液在稀释后应有类似金属光泽，否则染色液可能已失效。

　　本染色工作液应保持中性，尤其是用于稀释的PBS。在酸性环境下，细胞质蛋白正电荷增多，易被伊红染成红色;在碱性环境下，细胞质蛋白负电荷增多，易被亚甲基蓝染成蓝色。酸性或碱性环境都会造成染色异常，以致识别困难，影响正确判断。推荐使用PBS (C0221A)或PBS (10X) (ST476)。

　　吉姆萨染色液对人体有毒性，且易燃。操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

　　本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

　　为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

　　使用说明：

　　1.试剂的准备工作

　　改良吉姆萨染色工作液(1X)的配制：根据样品数量，取适量改良吉姆萨染色液(20X)，加入PBS或双蒸水稀释20倍即成改良吉姆萨工作液(1X)。例如1ml改良吉姆萨染色液(20X)加入19ml PBS，混合均匀，即得20ml改良吉姆萨染色工作液(1X)。注：稀释后的改良吉姆萨染色工作液(1X)为即用型试剂，不宜保存，应现用现配，以免影响染色效果。

　　2.样品处理

　　a.对于石蜡切片：

　　二甲苯中脱蜡5-10分钟。

　　换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。

　　无水乙醇5分钟。

　　90%乙醇2分钟。

　　80%乙醇2分钟。

　　70%乙醇2分钟。

　　b.对于冰冻切片：

　　蒸馏水洗涤2分钟。

　　c.对于血液或骨髓涂片：

　　按照常规方法制作血涂片或骨髓涂片，自然晾干。

　　70%乙醇固定10分钟。

　　d.对于培养细胞：

　　加入70%的乙醇固定10分钟。

　　3.改良吉姆萨染色

　　a.切片或涂片样品加入适量配制好的改良吉姆萨染色工作液(1X)染色45分钟。注：如果染色过深或过浅应调整染色时间或工作液浓度。

　　b.用蒸馏水从一侧充分洗涤，干燥后即可在显微镜下观察和拍照。

　　改良吉姆萨染色液上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。古朵试剂盒