干粉培养基的配置和注意事项
时间:2023-11-07 阅读:663
干粉培养基的配置和注意事项
干粉培养基是将配制好的培养基进行脱水处理,这样便于保存及销售。
干粉培养基的优缺点:
优点在于便于运输、可以长期储存,不过需要使用者自行配置方可以使用, 配制时需要制备细胞培养用的纯水, 有时也存在溶解性不好的问题。
缺点在于批次间的重复性不太好。
干粉培养基的配置:
1. 在一个尽可能接近总体积的容器中加入比预期培养基总体积少5%的双蒸水。
2. 在室温(20℃到30℃)的水中加入干粉培养基,轻轻搅拌,不要加热。
3. 水洗包装袋的内部,转移全部的痕量干粉到容器内。
4. 加NaHCO3到培养基中。
5. 用双蒸水稀释到想要的体积,搅拌溶解。注意不要过分搅拌。
6. 通过缓慢搅拌加入1N NaOH 或1N HCL调节pH值,由于pH值在过滤时会上升0.1到0.3,因而调节pH值使它比最终想要的pH值低0.2到0.3。培养基在过滤前要保持密封。
干粉培养基的注意事项:
1. 干粉不包含的成分,常见的有NaHCO3、丙酮酸钠、HEPES等。这些成分有些是必须添加的,如NaHCO3、有些根据实验需要决定。
2. 配制是要保证充分溶解,NaHCO3等物质都要等培养基溶解之后才能添加。
3. 配制所用的水应是三蒸水,离子浓度很低。
4. 所用器皿应严格消毒。
5. 配制好的培养基应马上过滤,无菌保存于4度。
6. 液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培养基,它是一种灭菌后保证无菌的溶液,必要时可制成无内毒素等的溶液,可节省科研人员的工作量。
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