古朵为你解说ELISA试剂盒在实验中的常见问题

　　1 血清的运用

　　冰冻状态融化运用时，应先混匀，未用完有些可在4℃保留5天。不宜重复冰融或自行分装。展开某项查验的室内质控工作需要的质控血清，通常按3-6个月用量预备。自制的不定值质控血清，在一批质控血清将用完之前，需预备下一批质控血清。质控血清请求功能安稳，较长期内效价不变，其理化性质应与患者样本附近，这么才干有效地起到监测效果。

　　2 临界值质控血清

　　质操控血清分定值和不决值两种。如只用一份质控血清定值，通常定在正常值与异常值交界点上，定性测守时处于弱阳性水平，称为临界值。乙肝标志物临界值的拟定，应按临床请求，为临床供给一致的判别弱阳性的规范。

　　临界值质控血清能够作为试剂盒中的阳性对照品和阴性对照品以外的第三个对照品，它能够活络地反映出试剂盒的检出水平，确保弱阳性反响的标本不漏检。

　　3 质控血清的制备

　　每个实验室能够根据自己的条件，选用临床基地供给的质控血清，或按以下办法自己制备本室运用的质控血清(以乙肝质控血清为例)。

　　1) 搜集新鲜的无溶血、无黄疸、无细菌污染的阳性血清。

　　2) 56℃加热10小时来活。

　　3) 离心或过滤除掉沉淀。

　　4) 用10%的小牛血清或正常人血清(PBS缓冲液)将搜集的血清稀释至所需的浓度。如能用正常的人血清稀释更好，因其成份更接近于检测标本。

　　5) 抽滤除菌。按一次运用的量分装小安瓿，封口，20℃保留备用。不行重复冻融。

　　被检物请求检出的水平常被认为是质控血清应挑选的水平。如果该实验还有其它请求，则应加所请求浓度的质控物。

　　6) 标定含量。20-30次测定成果删去>±2SD数据的均值作为靶值，并与已知定值血清对比测定。

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