血清中经常出现的沉淀到底的原因，这样还能使用吗?
 

　　细胞培养中使用血清时经常会遇到沉淀，这些沉淀到底是为何物，对实验的影响有多大，如何有效去除这些沉淀，古朵生物本文对沉淀的一般情况做了简单汇总，方便大家查询和学习。

　　沉淀物到底是什么

　　关于目前血清的过滤处理，不管是国内还是国外，普遍都采用多道100nm的连续过滤方式，从技术上已经去除掉血清中可能含有的支原体、病毒等微生物，所以如果您是通过正规途径买到的血清(市面上血清鱼龙混杂，请选择高信誉的血清牌子)，原则上不会有生物污染情况。

　　基于多年的实验研究，用于细胞培养的胎牛血清以及其它血清中可能会存在以下种类的沉淀物：

　　纤维蛋白

　　是经常出现的较大的沉淀物，可以达到1-2mm，可以用肉眼观察到。因为血清都是在低温下进行收集和快速处理的，一些纤维蛋白原(可溶性的形成絮状纤维蛋白的前体)在处理过程中仍然处于溶解状态，当经过最后的过滤分装后，就会在瓶中凝结出现纤维蛋白沉淀。

　　硫酸钙

　　也是常见的一种沉淀物，通常会使血清出现浑浊，并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点，这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动，因此经常被误认为是微生物污染。

　　其它物质

　　包括脂肪酸酯以及一些蛋白质等，他们也是血清中出现沉淀物的常见原因。

　　血清中出现一些絮状、泥沙状等白色固体后，还能用吗，对实验的影响有多大?

　　血清中出现沉淀是正常的物理析出现象可放心使用：

　　1、细胞培养效果?

　　多项数据表明，血清析出少量蛋白质后，细胞培养效果并不会有明显的变化。

　　2、过滤去除沉淀?

　　如果出现大量的沉淀物，血清将很难过滤。

　　一般说来，因为在血清生产时后来已经经过0.22μm及0.1μm滤芯过滤处理，并且按照现行版药典规定进行无菌检测，因此不推荐再过滤血清。

　　如非必要，在实验室中无需再过滤处理血清，以免操作不规范导致污染的发生。

　　3、沉淀or污染?

　　磷酸钙往往被误认为微生物污染而引起争端。

　　研究者可能会在血清中观察到一些絮状的沉淀，因此就会比较警觉的去做无菌试验，将血清放在培养箱中培养几天，结果可能会观察到更多的絮状沉淀，因此就断定血清被污染了;并且当研究者将血清样品放在倒置显微镜下观察时往往可以看到一些可以运动的小黑点，因此就更加确认是血清被污染了。于是，研究者就会花费更多的时间和精力来和生产商确认，但确定血清没有被污染而只是沉淀。

　　为了避免这些问题的发生，我们建议不要直接将血清放在培养箱中培养观察是否有菌，而是将血清加到琼脂板上进行培养以观察是否有细菌生长。另外，也可以进行革兰氏染色，在油镜下观察，以确认是否有污染。

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