冷冻干燥保藏转接技术

　　建议用下列方法恢复培养冷冻干燥保藏的菌种。

　　1、安瓶管开封

　　用浸过70％酒精的脱脂棉擦净安瓿管。

　　用火焰将安瓿管顶端加热。

　　滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。

　　用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。

　　2、菌株恢复培养

　　用无菌吸管，吸取0.3-0.5ml适宜的液体培养基,滴人安瓿管内,轻轻振荡,使冻于菌体溶解呈悬浮状

　　取0.1-0.2ml菌体悬浮液，移植于适宜的琼脂斜面/平板培养基上，剩余的菌液，注入适宜的液体培养基内，然后在建议的温度下培养。

　　3、注意事项

　　菌种活化前，请将安瓿管保存在6一10℃的环境下。

　　厌氧菌的培养，如无特别说明，自开封至接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态。

　　某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需连续两次继代培养才能正常生长,此时请将步骤二重复 一次。