真菌的保藏方法及优缺点分析进行优劣比较
时间：2024-08-15 阅读：102
真菌资源的研究利用多以培养物方式保藏，在多数情况下，真菌资源保藏者一般只监测菌株的活性指标，而真菌形态特征、菌株酶活、致病力、产生次级代谢物的能力等菌株功能特征是否稳定却由于技术、工作量等原因往往被忽略。真菌的长期保藏要保证菌株的生理性状和遗传信息的完整性[1]。本文通过简述真菌长期保藏过程中一些菌株的形态、生理生化性状的变化，旨在引起对真菌长期保藏与监测的重视。
目前有很多保藏方法可以适用于真菌的保藏，但大体来可以分为三类：一是让真菌连续生长的保藏工艺[2]。这一类的保藏工艺的特点是不断的将菌株移植在新鲜的培养基上，并在合适的条件下生长，随后置于一个低温的环境中，一般是4-10℃，这类保藏工艺主要包括斜面移植、油管保藏和蒸馏水保藏法等。二是利用干燥环境保藏菌株的休眠体，如分生孢子、厚垣孢子等，干燥选用的基质可以是空气、硅胶、土壤、沙子等。三是利用抑制菌株代谢活性的办法达到长期保藏，一般是通过脱水降低细胞内水分或低温冷冻，在此过程中关键环节是避免和降低冰晶对细胞造成的伤害，这类保藏工艺包括冷冻干燥法、低温冻结和液氮保藏法等。Ryan和Smith对各种保藏方法进行了优劣比较[3]。
大多数真菌资源研究利用基本上是以得到纯的培养物为前提，而真菌在培养的过程中，必然离开原来的生长环境，营养、环境条件发生改变，这是真菌发生性状改变的重要因子，真菌培养物长期保藏就会不可避免的发生性状变化。难以培养的真菌以及一些专性寄生真菌不能在人工培养基上培养生长，其主要原因是在目前认知条件下，不能够提供此类微生物生长所需的必要条件。此外，丝状真菌保藏一般采用保藏真菌的孢子、菌丝，其中保藏真菌的孢子一般周期较长，活性较为稳定，但无论在无性阶段产生分生孢子还是有性阶段产生的性孢子，都是经过基因重组阶段，这就增加了保藏菌株发生变异的可能性[4]。真菌在分离、培养、保藏的工艺处理、长期保藏、保藏后复活等环节上，都有可能造成真菌细胞发生损坏或基因组信息缺失，从而引起性状发生变化。