人单纯疱疹病毒1IgM抗体(HSV1-IgM)
时间:2021-09-01 阅读:172
人单纯疱疹病毒1IgM抗体(HSV1-IgM)试剂盒(ELISA)
使用说明书
l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人单纯疱疹病毒1IgM抗体(HSV1-IgM)的含量。
l 有效期:6个月
l 保存条件:2-8℃
l 本试剂盒仅供科研使用,不得用于临床诊断
实验原理
试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人单纯疱疹病毒1IgM抗体(HSV1-IgM)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人单纯疱疹病毒1IgM抗体(HSV1-IgM)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样本处理及要求
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将*碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。