细胞名称:F81（猫肾细胞）实验方法

细胞形态

背景描述

生长培养基

RPMI-1640(货号:PM150110)＋10% FBS(货号:164210-500)＋1% P/S(货号:PB180120)

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
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6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

HA tag标签抗体 HA tag
荷尔蒙敏感脂肪酶抗体 HSL/LIPE
血红蛋白α1/α-Globin抗体 HBA1
Fas相互作用蛋白激酶2抗体 HIPK2
Fas相互作用蛋白激酶3抗体 HIPK3
人类疱疹病毒8抗体 HHV8 ORF50
磷酸化热休克蛋白27抗体 Phospho-HSP27 (Ser82)
人类疱疹病毒8抗体 HHV8/ORF K2
人类疱疹病毒8抗体 HHV8 ORF50
雌激素下调基因1蛋白抗体 HEXIM1
转录因子HEY2蛋白抗体 HEY2
肺癌相关蛋白Y抗体 LAGY
心脏和神经嵴衍生蛋白1抗体 HAND1
己糖激酶2抗体 Hexokinase II
热休克蛋白90α/HSP90 α抗体 HSP90 alpha
血红蛋白β抗体 Hemoglobin Beta
透明质酸结合蛋白2抗体 HABP2
透明质酸及粘蛋白2抗体 HAPLN2
透明质酸合成酶3抗体 HAS3
热休克蛋白56抗体 FKBP52
热休克蛋白70相互作用蛋白抗体 HSPABP/HIP/HSC70 Interacting Protein HIP
热休克蛋白相关蛋白4抗体 DNAJA1
透明质酸合成酶2抗体 HAS2
同源盒基因HOXA3蛋白抗体 HOXA3
同源盒基因HOXA4蛋白抗体 HOXA4
同源盒基因HOXA6蛋白抗体 HOXA6
同源盒基因HOXA7蛋白抗体 HOXA7
羟基类固醇(17β)脱氢酶4/17β-HSD4抗体 HSD17B4
血红蛋白ζ链/Hemoglobin ζ 抗体 HBZ
血红素结合蛋白1抗体 HEBP1
血红蛋白α抗体 Hemoglobin alpha
结合球蛋白β抗体 Haptoglobulin beta
海马丰富基因转录蛋白1抗体 HIAT1
组蛋白H2AZ抗体 Histone H2A.Z
热休克因子2结合蛋白抗体 HSF2 binding protein

抗体（C端）IgG 变叶木*培养基  0.2ml
Ai-Synaptopodin/FITC  荧光素标记突触极蛋白synaptopodin抗体IgG 风信子*培养基  0.2ml
Ai-Synapsin II /FITC  荧光素标记神经突触素2抗体IgG 离体培再生（rhizogenesis）培养基  0.2ml
Ai- Alpha-Synuclein/FITC  荧光素标记核突触蛋白-α抗体IgG 离体培养愈伤组织再生（callogenesis）培养基  0.2ml
Ai-phospho-Synapsin I (Ser9) /FITC  荧光素标记磷酸化神经突触素1抗体IgG 离体培养枝芽发生（caulogenesis）培养基  0.2ml
Ai-phospho-Synapsin I (Ser553) /FITC  荧光素标记磷酸化神经突触素1抗体IgG 菊花组织冻存试剂盒  0.2ml
Ai- Gamma-Synuclein/SNCG /FITC  荧光素标记核突触蛋白-γ抗体IgG 气生兰（epiphytic）播种增殖培养基   0.2ml
Ai-Syaxin 1/Syn1A /FITC  荧光素标记突触融合蛋白1抗体IgG 气生兰（epiphytic）移植维护培养基  0.2ml
Ai-Alpha-Synuclein/FITC  荧光素标记核突触蛋白/突触素-1抗体IgG 气生兰（epiphytic）克隆增殖培养基  0.2ml
Ai-SYPH1/FITC  荧光素标记synphilin-1抗体IgG 地生兰（terrestrial）播种培养基   0.2ml
Ai-SYVN1/FITC  荧光素标记滑膜细胞凋亡抑制物1抗体IgG 地生兰（terrestrial）移植维护培养基  0.2ml
Ai-TNF- Alpha /Biotin  *标记 肿瘤坏死因子抗体 地生兰（terrestrial）增殖培养基  0.2ml
Ai-T3/FITC  荧光素标记三碘甲狀腺素T3抗体IgG 兰花Knudson培养基  0.2ml
Ai-TACR3/NK-3 receptor /FITC  荧光素标记速激肽受体3抗体IgG 兰花Vacin & We培养基  0.2ml