【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称:EBTr(NBL-4)（牛胚气管细胞）操作步骤

细胞形态

成纤维细胞样

背景描述

EBTr(NBL-4)细胞牛痢疾病毒(BVDV)阴性。

生长培养基

MEM(货号:PM150410)＋10% FBS(货号:164210-500)＋1% P/S(货号:PB180120)

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

EBTr(NBL-4)（牛胚气管细胞）操作步骤冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
EBTr(NBL-4)（牛胚气管细胞）操作步骤操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
EBTr(NBL-4)（牛胚气管细胞）操作步骤优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
滋养层细胞抗原3β-HSD抗体 HSD3B1
乙酰化组蛋白H4抗体 Acetyl-Histone H4(K8)
磷酸化高迁移率核小体结合蛋白1 phospho-HMGN1(Ser20+Ser24)
附睾分泌蛋白4抗体 HE4
*基化组蛋白H3抗体 Histone H3 (Tri Methyl K4)
三羟基*基*还原酶抗体 HMGCR
硫酸乙酰肝素蛋白多糖2 Heparan Sulfate Proteoglycan 2
肝癌相关抗原hca25a HCA25a
己糖激酶3抗体 Hexokinase 3
人乙肝病毒pre S1/S2蛋白抗体 HBV pre S1 protein
人乙肝病毒pre S1蛋白抗体 HBV pre S1 protein
己糖激酶1抗体 Hexokinase 1
己糖激酶2抗体 Hexokinase 2
热休克蛋白90α抗体 HSP90 alpha
肝细胞源性纤维蛋白原相关蛋白1抗体 HFREP1
红细胞分化相关基因蛋白抗体 Hemogen
同源异型盒基因HOXA13抗体 HOXA13
磷酸化组蛋白去乙酰化酶4(Ser246)抗体 Phospho-HDAC4 (Ser246)
磷酸化组蛋白去乙酰化酶7抗体 Phospho-HDAC7(Ser155)
磷酸化组蛋白去乙酰化酶4抗体 phospho-HDAC4 (Ser632)
磷酸化组蛋白去乙酰化酶7抗体 phospho-HDAC7(Ser486)
HIRA相互作用蛋白3抗体 HIRIP3
HOOK1蛋白抗体 HOOK1
人类免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp41+gp160抗体 HIV2 gp41 + gp160
人类免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp41+gp160抗体 HIV2 gp120 + gp160
HCG3蛋白抗体 HCG3
HER4抗体 ErbB4
记磷酸化微管相关蛋白抗体IgG 纯化大鼠肾上腺髓质素（AM）基因重组表达载体（pGEFP-AM）测序引物对  0.2ml
Ai-Tat/FITC  荧光素标记细胞*转氨酶抗体IgG 大鼠肾上腺髓质素（AM）基因重组表达载体（pGEFP-AM）感受态菌DH-5α  0.2ml
Ai-TBX2/T-box2/FITC  荧光素标记新型抑癌基因抗体IgG 人体RUNX3（AML-2）基因cDNA产物  0.2ml
EBTr(NBL-4)（牛胚气管细胞）操作步骤Ai-TBX2/T-box2/FITC  荧光素标记新型抑癌基因抗体IgG 人体RUNX3（AML-2）基因引物对  0.2ml
Ai-TCF7L2/FITC  荧光素标记转录因子7类似物2抗体IgG 纯化人体RUNX3基因重组表达载体（pCMV5－RUNX3）  0.2ml
Ai-TCRG/FITC  荧光素标记抗T细胞受体γ抗体IgG 纯化人体RUNX3基因重组表达载体（pCMV5－RUNX3）测序引物对  0.2ml
Ai-TDAG51/FITC  荧光素标记TDAG51抗体IgG 人体RUNX3基因重组表达载体（pCMV5－RUNX3）感受态菌DH-5α  0.2ml
Ai-TDP-43/TARDBP /FITC  荧光素标记Tar DNA 结合蛋白43抗体IgG 纯化人体RUNX3基因重组表达载体（pcDNA-RUNX3）  0.2ml
Ai-TBX3/FITC  荧光素标记转录因子Tbx3抗体IgG 纯化人体RUNX3基因重组表达载体（pcDNA-RUNX3）测序引物对  0.2ml
Ai-omerase Binding Protein，P23/FITC  荧光素标记端粒酶结合蛋白P23抗体IgG 人体RUNX3基因重组表达载体（pcDNA-RUNX3）感受态菌DH-5α  0.2ml
Ai-Tbx21/T-bet/FITC  荧光素标记T细胞介导的转录调节因子Tbx21抗体IgG 纯化人体RUNX3基因重组表达载体（pGEFP-RUNX3）  0.2ml
Ai-TEM 1/CD248/FITC  荧光素标记内涎蛋白/内皮唾液酸蛋白抗体IgG 纯化人体RUNX3基因重组表达载体（pGEFP-RUNX3）测序引物对  0.2ml
Ai-TEM8/FITC  荧光素标记肿瘤血管内皮标志物8抗体IgG 人体RUNX3基因重组表达载体（pGEFP-RUNX3）感受态菌DH-5α  0.2ml
Ai-Tenascin C/FITC  荧光素标记固生蛋白抗体IgG pcDNA3.1＋目的基因  0.2ml
Ai-Tenascin/TN /FITC  荧光素标记细胞粘合素抗体