细胞名称:LLC-MK2（恒河猴肾细胞）实验方法

细胞形态

上皮细胞样

背景描述

LLC-MK2细胞源自6只成年绿猴的肾细胞悬液。据报道，LLC-MK2细胞对很多病毒敏感，包括肠道病毒、鼻病毒、粘病毒和痘病毒家族中的成员。

生长培养基

MEM(货号:PM150410)＋10% FBS(货号:164210-500)＋1% P/S(货号:PB180120)

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
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6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
sulphate protoglycans 1
叉头蛋白J1抗体 HFH-4
艾滋病病毒抗体 HIV p55+NP7
艾滋病病毒抗体 HIV p55+P6-Gag
艾滋病病毒抗体 HIV1 p55+p17
结合珠蛋白相关蛋白抗体 HPR
L-*脱羧酶抗体 HDC
乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白 HBXIP
组蛋白H2B.s抗体 Histone H2B.s
组蛋白去乙酰化酶4+5+9抗体 HDAC4 + 5 + 9
热休克蛋白27相关蛋白1抗体 HSPBAP1
卟胆原脱氨酶抗体 HMBS
异质核糖核蛋白U2样蛋白抗体 HORMAD2
肝癌衍生生长因子2抗体 HRP2
肝癌相关抗原57抗体 HCA57
补体C3抗体 Complement C3
甲型流感病毒血凝素抗体 H1N1 Hemagglutinin 2
甲状旁腺功能亢进蛋白2/细胞分裂周期73抗体 HRPT2
线粒体*蛋白酶抗体 HTRA2
钾/钠超极化激活环核苷酸门控通道蛋白2抗体 HCN2
热休克蛋白β7抗体 HSPβ7
钾/钠超极化激活环核苷酸门控通道蛋白3抗体 HCN3
铁调节蛋白25抗体 Hepcidin-25
HD域内含蛋白2抗体 HDDC2
艾滋病病毒p55抗体 HIV1 p55 + p17
造血细胞激酶抗体 Hck
HEAT重复内含蛋白5B蛋白抗体 HEATR5B
缺氧诱导基因1B蛋白抗体 HIGD1B
乙酰化组蛋白H4抗体 Acetyl-Histone H4(K5)
热休克蛋白B2抗体 HSPB2
人类白细胞抗原B27 HLA B27
螺旋环螺旋转录因子HATH6抗体 Protein atonal homolog 8
神经调节蛋白1β2抗体 HRG1
HDHD3蛋白抗体 HDHD3
子–β受体1抗体IgG 正常女性人体肝组织S9组分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-TGF- BetaR 2/FITC  荧光素标记转移生长因子–β受体2抗体IgG 吸烟者人体肺组织S9组分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-TGF- BetaR 3/FITC  荧光素标记转移生长因子–β受体3抗体IgG 非吸烟者人体肺组织S9组分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-TGM3/FITC  荧光素标记转谷氨酰酶3抗体IgG 正常人体肠组织S9组分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-Thioredoxin 1/FITC  荧光素标记硫氧还蛋白抗体IgG 正常人体肾组织S9组分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-Thymosin Alpha-1/FITC  荧光素标记* α-1抗体IgG 正常男性人体肝组织微粒体组分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-Tie1/FITC  荧光素标记血管生成素-1受体抗体IgG 正常女性人体肝组织微粒体组分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-Tie2/FITC  荧光素标记上皮生长因子样域*激酶2IgG 吸烟者人体肺组织微粒体组分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-Phospho-Tie2 (Tyr992) /FITC  荧光素标记磷酸化血管生成素受体2抗体IgG 非吸烟者人体肺组织微粒体组分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC  荧光素标记磷酸化血管生成素受体2抗体IgG 正常人体肠组织微粒体组分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-TIEG1/KLF10/FITC  荧光素标记TGF-β诱导早期应答基因1抗体IgG 正常人体肾组织微粒体组分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-RALDH2/FITC  荧光素标记*脱氢酶2型抗体IgG 正常大鼠（Sprague Dawley）肝组织微粒体组分（5 毫克/毫升）  0.2ml
ai-RARRES1/TIG1/FITC  荧光素标记*受体应答蛋白1抗体IgG 正常大鼠（Sprague Dawley）肺组织微粒体组分（5毫克/毫升）  0.2ml
Ai-TIGAR humen/FITC  荧光素标记兔抗人TIGAR蛋白抗体IgG 正常大鼠（Sprague Dawley）肠组织微粒体