1.产品名称：兔主动脉平滑肌细胞实验方法

2.组织来源：主动脉组织

3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

兔主动脉平滑肌细胞分离自主动脉组织；主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为：升主动脉起于左心室，至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓，弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉；在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉，以上为胸主动脉，至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉；髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发生、发展中具有重要作用，以主动脉平滑肌细胞为实验研究对象，探讨心血管疾病相关发病机制是目前研究的热点；体外培养的主动脉平滑肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

本公司的兔主动脉平滑肌细胞采用*-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经alpha-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

5.培养基信息：

DMEM[H]、FBS、平滑肌细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
胶体金标记的羊抗人IgG IRS-1
FITC标记的兔抗人IgG AQP3(aquaporin 3)
辣根过氧化物酶标记的兔抗马IgM IRS-2
Alexa Fluor 488标记的羊抗人IgG AQP1(Aquaporin1)
Alexa Fluor 647标记的小鼠抗人IgG IRS-3
PE标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 IRS-4
辣根过氧化物酶标记兔抗人IgA IRS P53 (Insulin receptor substrate P53)(多肽)
*标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 PGE2 peptide
*标记的兔抗人IgG Integrin Beta chain (ITG- Beta3/ITGB3)
*标记的小鼠抗人IgG AQP9(aquaporin Protein-9)
*标记的兔抗人分泌型IgA Leptin
*标记的羊抗人IgM Leptin receptor(long)
Alexa Fluor 488标记的驴抗人IgG phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide
PE-CY5标记的兔抗人IgG MAPK-1/2
PE标记的小鼠抗人IgG MAPKK2
Alexa Fluor 647标记的兔抗人IgG M2-PK ( pyruvate Kinase M2)
*标记的兔抗长爪沙鼠IgG M2-PK ( pyruvate Kinase M2 )
PE-Cy5.5标记的兔抗小鼠IgG-Fc p-Arhgef2/GEF-H1(Rho guanine nucleotide exchange factor 2,pSer810)
PE-Cy7标记的兔抗小鼠IgG-Fc Melan-A/MART-1
PE-Cy3标记的兔抗小鼠IgG-Fc ARIP2a(Activin receptor 2A)
PE-CY5标记的兔抗小鼠IgG-Fc Beta-arrestin 1/2(beta-arrestin 1/2)
*标记的兔抗小鼠k链 ARIP2B(Activin receptor 2B)
Alexa Fluor 647标记的兔抗猴IgM MTR-1A (Melatonin receptor-1A)
PE标记的兔抗小鼠k链 MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又称：MYC
PE-CY5标记的兔抗小鼠k链 N-coR1 (Nuclear receptor co-repressor 1)
 48T
PPAR- Alpha(Human peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit  人过氧化物酶体增殖物激活受体α   48T
Apo-E(Human Apolipoprotein E) ELISA Kit  人载脂蛋白E   48T
OGP(Human Osteogenic Growth Peptide) ELISA Kit  人成骨生长肽   48T
ODF(Human osteoclast differentiation factor) ELISA Kit  人破骨细胞分化因子   48T
OH-PYD(Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks) ELISA Kit  人羟基胶原吡啶交联   48T
DPD(Human Deoxypyridinoline crosslinks) ELISA Kit  人脱氧胶原吡啶交联   48T
PYD(Human Pyridinoline crosslinks) ELISA Kit  人胶原吡啶交联   48T
SPA(Human Staphylococal protein A) ELISA Kit  人葡萄球菌蛋白A   48T
ConA(Human concanavalin A) ELISA Kit  人刀豆素A   48T
FEP(Human Free erythrocyte proloporphyrin) ELISA Kit  人游离原卟啉   48T
LBP(Human lipolysaccharide binding protein) ELISA Kit  人脂多糖结合蛋白   48T
GSH-Px(Human Glutathione peroxidase) ELISA Kit  人*过氧化酶   48T
GSH(Human glutathione) ELISA Kit  人*   48T
17-KS(Human 17-ketosteroids) ELISA Kit  人17-酮类固醇   48T
17-OHCS(Human 17-Hydroxycorticosteroids) ELISA Kit  人17羟皮质类固醇   48T
cath-K(Human Cathepsin K) ELISA Kit  人组织蛋白酶K   48T
BMPs(Human bone morphogenetic proteins) ELISA Kit  人骨形成蛋白   48T
RBP-4(Human Retinol binding protein 4) ELISA Kit  人*结合蛋白4   48T