NTP 溶液，10mM0.5mL实验步骤产品介绍：

NTP 溶液，10mM0.5mL实验步骤产品及特点:

本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶（M-MuLV RT）高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶，内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物（前两种本试剂盒提 供）。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。

合成建文库用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意：RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意：随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含 dNTP）。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板，可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物，则改成 25℃ 5 分钟）。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然 后再转移到 42℃保温 60 分钟）。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer（含标记 dNTP，本试剂不提供）。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟（但如果使用随机引物，需要先 25℃保温 10 分钟，然后再转移到 42℃保温 60 分钟）。
7. 加 1uL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上，电泳一般能出现 1.1Kb 的片段（如果使用随机引物，将出现多个小片段）。

〖保存〗：2～8℃
香豆素
〖英文名称〗：Coumarin；1,2-Benzopyrone；5,6-Benzo-2-pyrone；cis-o-Coumarinic acid lactone；Coumarinic anhydride；Tonka bean camphor
〖其他名称〗：香豆内酯；1,2-苯并哌哢；氧杂萘邻酮；邻氧萘酮；苯并邻氧芑酮；1,2-苯并吡喃酮；2H-1-苯并吡喃-2-酮 
〖CAS号〗：91-64-5 
C9H6O2=146.14 
〖级别〗：AR
〖含量〗：≥98.0%
〖熔点〗：68～70℃
乙醇溶解试验：合格
〖灼烧残渣〗：≤0.1%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：无色斜方或长方晶体或粉末。有香荚兰豆香，有灼烧味，味苦。溶于乙醇、乙迷、氯方、挥发油和氢氧化碱溶液中，微溶于沸水。〖相对密度〗(d204)0.935。〖熔点〗68～70℃。沸点297～299℃。闪点162℃。

红细胞 NADH 高铁血红蛋白还原酶测试盒    植物线粒体纯化试剂盒 ( 粗提 )
琥珀酸脱氢酶测试盒    植物线粒体纯化试剂盒 ( 精提 )
活性氧 ( 羟自由基 ) 测试盒 ( 比色法 )    宿主细胞系列
活性氧检测试剂盒    *琼脂糖
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碱性磷酸酶测试剂盒    超敏化学发光 (HRP) 检测试剂盒（ECL）
碱性磷酸酶测试剂盒    血液保存和 DNA 纯化套装
抗离子酸性磷酸酶检测试剂盒    SP6 RNA 聚合酶
抗酒石酸酸性磷酸酶检测试剂盒    SP6 RNA 聚合酶
葡萄糖 -6- 磷