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组织/细胞裂解液重要特点以及选择指南（MKBIO）

时间：2018-10-04 阅读：872

前言：

在免疫印迹（WB）、免疫沉淀（IP）、免疫共沉淀（Co-IP），以及染色质免疫沉淀（ChIP）等许多研究组织或细胞内蛋白表达，蛋白纯化以及蛋白-蛋白、蛋白-核酸间互作的各种免疫实验内，首先要做的步就是进行组织（细胞）裂解，通过破坏细胞膜或细胞核膜的屏障，将要待研究的对象释放到体外环境中。为此，拥有合适的组织/细胞裂解液是开展实验重要的一环。

针对各种下游实验的特点，懋康生物（MKBio）提供几种常见的组织/细胞裂解液，基本涵盖用户需求。

总表：各种组织/细胞裂解液主要特点和应用差异（MKBIO）

产品货号	MP1501	MP1502	MP1503	MP1504	MP1505	MP1506	MP1507	MP1508
产品名称	RIPA裂解液（强）	RIPA裂解液（中）	RIPA裂解液（弱）	WB/IP裂解液	NP-40裂解液	SDS裂解液	RIPA裂解液（强，无抑制剂）	WB/IP裂解液（无抑制剂）
有效裂解成分	1% Triton X-100，1%脱氧胆酸钠，0.1% SDS	1% NP-40，0.5%脱氧胆酸钠，0.1% SDS	1% NP-40，0.25%脱氧胆酸钠	1% Triton X-100	1% NP-40	1% SDS	1% Triton X-100，1%脱氧胆酸钠，0.1% SDS	1% Triton X-100
裂解强度	强	中	温和	温和	温和	强	强	温和
对膜蛋白的提取	很好	较好	一般	一般	一般	很好	很好	一般
对胞浆蛋白的提取	很好	很好	很好	很好	很好	很好	很好	很好
对核蛋白的提取	很好	较好	较好	较好	较好	很好	很好	较好
胞浆磷酸化蛋白提取	很好	很好	很好	很好	很好	很好	很好	很好
核转录因子提取	很好	很好	很好	很好	很好	很好	很好	很好
蛋白酶抑制剂	含有	含有	含有	含有	含有	含有	不含	不含
磷酸酶抑制剂	含有	含有	含有	含有	含有	含有	不含	不含
主要用途	WB，IP	WB，IP	WB，IP，Co-IP	WB，IP，Co-IP	WB，IP，Co-IP	WB，ChIP	WB，IP	WB，IP，Co-IP

组织/细胞裂解液选择说明：

a）对于普通的WB，IP，Co-IP，推荐使用WB/IP裂解液（# MP1504-100ML），经此裂解所得的产物没有非常粘滞的透明状DNA团块形成，不必采用超声处理等就可以非常理想地用于后续操作。另外，此裂解液裂解的产物也适合用于磷酸化蛋白的WB检测。

b）对于某些特殊蛋白的IP，如果WB/IP裂解液（# MP1504-100ML）效果不理想，可尝试用RIPA（强，中，弱）或NP-40裂解液。若发现IP背景很高，说明非特异性蛋白被沉淀下来，则需选用裂解强度较高的裂解液，如RIPA（强或中）。如果发现目的蛋白无法被沉淀下来，说明裂解液的强度过强，可使用较温和的裂解液如RIPA（弱）或NP-40裂解液。

c）对于某些难溶解蛋白的WB，如果WB/IP裂解液（# MP1504-100ML）效果不理想，可尝试使用裂解强度更高的裂解液如RIPA（强，中）或SDS裂解液。

d）对于特定用途需要自行添加特定抑制剂或不需添加抑制剂，可考虑选择RIPA裂解液（强，无抑制剂）（# MP1507-100ML）或WB/IP裂解液（无抑制剂）（# MP1508-100ML），后者很多情况下兼容酶活性和生物小分子的检测，具体兼容性如何请自行测试，我司无相应数据提供。

— —Written/Edited by V. Shallan【版权归MKBio懋康所有】

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