植物血凝素PHA的常见类型与生物应用
时间:2018-01-31 阅读:420
植物血凝素(Phytohemagglutinin,PHA)
(zui常用的促有丝分裂原(Mitogen))
关键词:
淋巴细胞转化实验(T Lymphocyte Transformation Test),非特异性有丝分裂原(mitogen),T细胞活化和增殖,PHA-M,PHA-P,PHA-L,PHA-E,Con A,CAS:9008-97-3
T淋巴细胞转化实验(T Lymphocyte Transformation Test)背景与意义:
T细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一。
Phytohemagglutinin(植物血凝素),简称为PHA,多指来源于Phaseolus Vulgaris菜豆属(红腰豆)的凝集素(lectin),常用于人淋巴细胞培养物的促有丝分裂原(mitogen),具有促进有丝分裂和诱导干扰素分泌的活性。PHA诱导B细胞活化效应比较弱,主要用做T细胞活化诱导剂。
Phytohemagglutinin(植物血凝素),简称为PHA,多指来源于Phaseolus Vulgaris菜豆属(红腰豆)的凝集素(lectin),常用于人淋巴细胞培养物的促有丝分裂原(mitogen),具有促进有丝分裂和诱导干扰素分泌的活性。PHA诱导B细胞活化效应比较弱,主要用做T细胞活化诱导剂。
植物血凝素(PHA)属于高分子糖蛋白,是低聚糖(由半乳糖,N-乙酰葡糖胺和甘露糖所构成)和蛋白质形成的复合物。由4个亚基通过非共价键结合形成的四聚体糖蛋白,包含两种亚基分子,L亚基(白细胞凝集素)和E(红细胞凝集素),因此含有5种异构体(L4, L3E1, L2E2, L1E3和E4)。L亚基具有白细胞凝集和高促有丝分裂活性,E亚基具有高红细胞凝集和低促有丝分裂活性。
目前市场上提供的植物血凝素(PHA)主要以PHA-L,PHA-E,PHA-M和PHA-P四种形式提供,在应用上具有一些差异,具体如下:
类型 | 应用 |
PHA-L | 纯化的L4,是白细胞凝集素,具有高促有丝分裂和白细胞凝集活性,但红细胞凝集活性极低。广泛用于免疫学研究,比如用作PBMC培养的刺激物;用作INF-γ ICS、ELISPOT实验的阳性对照;或用作顺行性神经示踪剂。 |
PHA-E | 纯化的E4,是红细胞凝集素,具有低促有丝分裂活性和高红细胞凝集活性。不具有血型特异性,但凝集作用会受到某些寡糖抑制。也常用于糖基化修饰研究。 |
PHA-P | 为未分离纯化PHA-E和PHA-L之前的原PHA蛋白形式(含PHA-E及PHA-L二种分子)。 |
PHA-M | PHA的粘性蛋白形式(mucoprotein form),与PHA-P成分差不多,都是粗提物,主要用于刺激外周血单个核细胞增殖,促进一些细胞因子生成和膜表面蛋白的表达。PHA-M具有强大的红细胞凝集特性,zui初用来分离全血中的淋巴细胞。 |
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