小 鼠 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 酶 联 免 疫 分 析剂 试 剂 盒 使 用  说 明 书        

本 试 剂 盒 仅 供 研 究 使 用 。  

检 测 范 围 检 测 范 围 检 测 范 围 检 测 范 围 ： ： ： ：                                                                                                                     9 6 T  

1 . 2 n g / m l   -   4 5 n g / m l  

使 用 目 的 使 用 目 的 使 用 目 的 使 用 目 的 ： ： ： ：  

本 试 剂 盒 用 于 测 定 小 鼠 血 清 、 血 浆 及 相 关 液 体 样 本 中 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 含 量 。  

实 验 原 理 实 验 原 理 实 验 原 理 实 验 原 理  

本 试 剂 盒 应 用 双 抗 体 夹 心 法 测 定 标 本 中 小 鼠 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 水 平 。 用 纯 化 的 小 鼠 三 磷

酸 肌 醇 ( I P 3 ) 抗 体 包 被 微 孔 板 ， 制 成 固 相 抗 体 ， 往 包 被 单 抗 的 微 孔 中 依 次 加 入 三 磷 酸 肌 醇

( I P 3 ) ， 再 与 H R P 标 记 的 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 抗 体 结 合 ， 形 成 抗 体 - 抗 原 - 酶 标 抗 体 复 合 物 ， 经 过

彻 底 洗 涤 后 加 底 物 T M B 显 色 。 T M B 在 H R P 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化

成 zui 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长

下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 通 过 标 准 曲 线 计 算 样 品 中 小 鼠 三 磷 酸 肌 醇 ( I P 3 ) 浓 度 。    

试 剂 盒 组 成 试 剂 盒 组 成 试 剂 盒 组 成 试 剂 盒 组 成    

1   3 0 倍 浓 缩 洗 涤 液   2 0 m l × 1 瓶   7   终 止 液   6 m l × 1 瓶  

2   酶 标 试 剂   6 m l × 1 瓶   8   标 准 品 （ 8 0 n g / m l ）   0 . 5 m l × 1 瓶  

3   酶 标 包 被 板   1 2 孔 × 8 条   9   标 准 品 稀 释 液   1 . 5 m l × 1 瓶  

4   样 品 稀 释 液   6 m l × 1 瓶   1 0   说 明 书   1 份  

5   显 色 剂 A 液   6 m l × 1 瓶   1 1   封 板 膜   2 张      

6   显 色 剂 B 液   6 m l × 1 / 瓶   1 2   密 封 袋   1 个  

标 本 标 本 标 本 标 本 要 求 要 求 要 求 要 求    

1 ． 标 本 采 集 后 尽 早 进 行 提 取 ， 提 取 按 相 关 文 献 进 行 ， 提 取 后 应 尽 快 进 行 实 验 。 若 不 能

马 上 进 行 试 验 ， 可 将 标 本 放 于 - 2 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融  

2 ． 不 能 检 测 含 N a N 3 的 样 品 ， 因 N a N 3 抑 制 辣 根 过 氧 化 物 酶 的 （ H R P ） 活 性 。  

操 作 步 骤 操 作 步 骤 操 作 步 骤 操 作 步 骤  

1 .   标 准 品 的 稀 释 ： 本 试 剂 盒 提 供 原 倍 标 准 品 一 支 ， 用 户 可 按 照 下 列 图 表 在 小 试 管 中 进 行 稀

释 。  

4 0 n g / m l   5 号 标 准 品   1 5 0 μ l 的 原 倍 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液  

2 0 n g / m l   4 号 标 准 品   1 5 0 μ l 的 5 号 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液  

1 0 n g / m l   3 号 标 准 品   1 5 0 μ l 的 4 号 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液  

5 n g / m l   2 号 标 准 品   1 5 0 μ l 的 3 号 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液  

2 . 5 n g / m l   1 号 标 准 品   1 5 0 μ l 的 2 号 标 准 品 加 入 1 5 0 μ l 标 准 品 稀 释 液  

2 .   加 样 ： 分 别 设 空 白 孔 （ 空 白 对 照 孔 不 加 样 品 及 酶 标 试 剂 ， 其 余 各 步 操 作 相 同 ） 、 标 准 孔 、

待 测 样 品 孔 。 在 酶 标 包 被 板 上 标 准 品 准 确 加 样 5 0 μ l ， 待 测 样 品 孔 中 先 加 样 品 稀 释 液 4 0 μ l ，