western blot的作用
免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术，在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物，然后利用抗原—抗体的特异性反应，从蛋白混合物中检测出目标蛋白，从而定量或定性地确定正常或实验条件下细胞或组织中目标蛋白的表达情况。Western blot还可用于蛋白—蛋白、蛋白—DNA和蛋白—RNA相互作用的后续分析，作为一种廉价、便捷、可靠的研究工具，将与质谱和蛋白质芯片等技术一起在蛋白质组时代发挥重要作用。ELISA试剂盒
Western bloting的注意事项
1、为了让实验更加严谨有说服力都要设计对照实验，对照分为：阳性对照（有标准品（比如β-actin，GAPDH）或阳性血清）；阴性对照（测血时用相应小鼠未免疫血清（即正常血）；空白对照（不加一抗，用PBS代替）；无关对照（用无关抗体）
2、一抗、二抗的浓度一般要参照抗体说明书选择zui适当的比例，一抗二抗的选择直接影响实验结果以及背景
3、实验设计时所釆用的抗原批次要一样，尽量的避免人为的带来个体差异。特别在做裂解液时更要注意所釆用的操作条件，尽可能的排除可变因素给实验带来不确定性。
4、凝胶的质量直接影响以后的实验结果，要特别注意几点：凝胶要均一没有气泡；积层胶与分离胶界面要水平；AP和TEMED的量不能过多，太多会导致胶易脆裂；拔梳子时要快，尽量保证点样孔平整。
5、电泳、转膜时特别要注意正负极，电压电流都不能过高；转膜时“三明治”的叠放次序不错，同时要防止产生气泡；尽量让电转温度保持在10度以下，冰浴为宜。
6、封闭时一般在室温下2h就够了，但是要注意如果是*标记的二抗就不宜用牛奶，因为牛奶中含有*，用BSA效果更好。
7、加一抗二抗要严格保证反应时间，洗膜要注意尽可能地将一抗二抗洗净，有利于降低背景；

EMR2    CD312抗体
eIF4EBP1    eIF4E结合蛋白抗体
Phospho-EGFR (Ser1045)    磷酸化表皮生长因子受体抗体
Phospho-EGFR (Tyr1138)    磷酸化表皮生长因子受体抗体
Ephrin A1 Receptor    肝配蛋白A1受体抗体
eIF2C2    真核翻译起始因子2C2抗体
EYA2    眼睛发育缺失蛋白EYA2抗体
EYA4    EYA4蛋白抗体
ELK4    血清反应因子辅助蛋白1抗体
ELMO2    吞噬细胞运动蛋白2抗体
EPB41    红细胞膜条带4.1蛋白抗体
phospho-EPO Receptor (Tyr485)    磷酸化红细胞生成素受体抗体

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