ELISA试剂盒在ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育，有人称之为孵育，在ELISA中似不恰当。
ELISA属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例，加入板孔中的标本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有zui贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。
    温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃（冰箱温度）等。37℃是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时，产物的生成可达。为加速反应，可提高反应的温度，有些试验在43℃进行，但不宜采用更高的温度。但因所需时间太长，在ELISA中一般不予采用。
    保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外，一般均采用水浴，可将ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度迅速平衡。为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱，ELISA板应放在湿盒内，湿盒要选用传热性良好的材料如金属等，在盒底垫湿的纱布，zui后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度，特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育，反应板均不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应，操作时的室温应严格限制在规定的范围内，标准室温温度是指20-25℃，但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时，ELISA板只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板同时测定。

BSEP    胆汁酸盐输出泵/ATP结合盒转运蛋白11抗体
Beta-2-MG(B2E5)    β2微球蛋白抗体(单抗)
Biglycan    骨/软骨蛋白多糖1抗体
CAP    染色体相关蛋白CAP抗体
BECN1L1    Bcl-2同源结构域样蛋白1抗体
BAG6    Bcl2相关抗凋亡基因6抗体
B4GALT7    半乳糖转移酶7亚基β1,4抗体
BEND5    BEN结构域蛋白5抗体
BBS5    巴德-毕德氏综合征蛋白BBS5抗体
BIN2    乳腺癌相关蛋白1抗体
Brain protein CG6    脑蛋白CG6抗体
BFSP2    晶状体蛋白2抗体
C7orf27    7号染色体开放阅读框27抗体
BCMP101    乳腺癌膜相关蛋白101抗体
BRLF1    立即早期癌基因BRLF1抗体（鼻咽癌基因）
BDNF    脑源神经营养因子抗体
BACE2    β淀粉样前体蛋白裂解酶2抗体
BHLHB5    螺旋一环一螺旋蛋白5抗体

ELISA试剂盒