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基因扩展技术

时间:2016-05-20      阅读:1129

     HPV DNA 的PCR扩增 评价HPV检测方法zui关键的因素是检测灵敏度,以基因扩增为基础检测HPV DNA,是目前zui灵敏的检测方法,可检测出低水平的病毒感染,并且能够比较准确地对HPV感染状态进行分类,因此成为实验室和流行病学研究的理想工具。但是,由于基因扩增过程中污染造成的假阳性及技术成本高,目前不宜作为临床实验室HPV感染的常规检测。ELISA试剂盒

     荧光定量PCR (FQ-PCR) 技术  FQ-PCR是1995年由美国Perkin Flmer公司研制成功的一种新型核酸定量检测方法,该法将普通PCR的高灵敏性、DNA杂交的高特异性和光谱技术的高性有机结合,克服了传统PCR在许多方面的缺点和局限性。由于荧光探针的引入,而且被释放的荧光基团数目与PCR产物数量相同,使得该方法对DNA模板定量的准确性与特异性都有很大提高。常用的PCR扩增仪与传统PC R扩增仪相比,应用更广泛、定量测量、检测效率明显提高、扩增产物无需电泳分析、无管道内污染及结果重复性好等特点。由于HPV-16型特异引物可与HPV66型模板DNA发生错配,传统PCR法扩增时,常对两者的扩增产物不易区分而造成HPV 16假阳性结果,但应用FQ-PCR技术,HPV 66型DNA不能扩增,从而增强了HPV分型检测的特异性。此外,FQ-PCR技术检测HPV感染的敏感性较传统PCR法增高,当HPV16, 18, 31, 33, 35亚型含量平均为1拷贝基因组/300个细胞时,即可用此法检测到。ELISA试剂盒

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