传代培养法的操作步骤
时间:2015-01-28 阅读:290
ELISA1.吸除培养瓶内旧培养液。
2.向瓶内加入*和EDTA混合液少许,以能覆满瓶底为限。
3.置温箱中2~5分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。
4.吸除消化液,向瓶内注入Hanks液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用*液单独消化,吸除*液后,可不用Hanks液冲洗,直接加入培养液。
5.用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。
6.计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。