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问答:大鼠ELISA试剂盒实验中关于温育您了解多少

时间:2014-12-02      阅读:454

大鼠ELISA试剂盒在实验前需要做足功课还要准备许多样本,如血清、血浆,尿液、细胞培养基、上清等。前期的准备固然重要,但是后期的步骤才是实验的关键,所以在实验过程中的每步都需要实验人员有足够的用心和耐心。关于大鼠ELISA试剂盒实验过程中温育的步骤您又了解多少呢?一起来竞答吧!

大鼠ELISA试剂盒保温
在ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育(在ELISA中似乎并不恰当。)
ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有zui贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。ELISA试剂盒在建立ELISA方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时,产物的生成可达。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为*,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中存放隔夜,以形成zui多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA中一般不予采用。
您的大鼠ELISA试剂盒实验过程中温育是否也是如此呢,如果不是的话就需要注意喽,如果是的话那就证明您的实验温育步骤很正确,请继续保持。

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