elisa检测试剂盒实验原理：

将目标抗体包被于微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入微生物化的目标抗体，将未结合的生物素抗体洗净后，加入HRP标记和亲和素，再次*洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），计算样品浓度。

elisa检测试剂盒反应步骤:

（1）严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30～60min。

（2）加样后及时放人孵箱。标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。

（3）封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板"的出现。 

（4）用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干：还要防止针口有纤维蛋白或异物，ELISA试剂盒这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板"的出现。

（5）合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。

（6）加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

（7）显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。

（8）加样时保持显色剂不外流；A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。

（9）应保证酶标板清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度。elisa检测试剂盒从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。

elisa检测试剂盒注意事项:

在收集标本前必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成分是否足够稳定，我们提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，请及时储存在4℃的条件下备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请在造模取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保持。因冰室与室温存在一定的温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以请避免反复冻融。有代测需求的客户，取材前请务必和我司销售人员索要说明书，具体操作事项请与我司技术人员保持沟通。