野鼠色基因相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒操作总结

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T10ng/L-245ng/L

使用目的：

本试剂盒用于测定兔血清、血浆、尿液及相关液体样本中转化生长因子β1(TGF-β1)含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔转化生长因子β1(TGF-β1)水平。用纯化的兔转化生长因子β1(TGF-β1)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入转化生长因子β1(TGF-β1)，再与HRP标记的转化生长因子β1(TGF-β1)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β1(TGF-β1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光（OD值），通过标准曲线计算样品中兔转化生长因子β1(TGF-β1)浓度。

试剂盒组成

130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶

2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（480ng/L）0.5ml×1瓶

3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶

4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份

5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张

6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能

马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀

释。

240ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

120ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

60ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

30ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

15ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液