1 选择ELISA试剂盒选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。

 2 加样可能原因：

 1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；

 2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长（特别是室内温度较高时）；

 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。

 解决办法：

 1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。

 2） 加样后及时放入孵箱。

 3） 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

 4） 如果采用AT或其他全自动加样，ELISA试剂盒选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。

 5） 标本较多时，请分批操作。

 3 孵育 可能原因：

 1） 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；

 2） 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。 

ELISA试剂盒解决办法：

 1） 贴封片或加盖；

 2） 按说明步骤严格控制操作时间。