如果您一直被兔ELISA试剂盒所困扰，那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间，但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液：蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素，包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、兔ELISA试剂盒抗体或检测试剂发生相互作用。
zui常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种封闭液便宜、稳定，在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用，因为很容易被洗掉。兔ELISA试剂盒因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度（正常浓度为0.01-0.1%），它会降低特异结合，产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液，后者可协助洗涤过程中的封闭。

   同时稳定与微孔板结合的抗原分子。封闭液包括牛血清白蛋白（BSA）、兔ELISA试剂盒脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。不过，它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。解决这个问题的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。另一点也很显而易见：切勿使用过多的检测试剂。兔ELISA试剂盒如果浓度过高，或者未正确稀释，则会导致高背景。也不要显色过度，如有必要，优化一下何时应加入终止液。
如果您的兔ELISA试剂盒不幸地遇到了高背景，那么也无需太担心，依次查看兔ELISA试剂盒系统中的组分，并排除可能存在的问题。悉心优化，相信很快就会有漂亮的结果。