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昆虫ELISA试剂盒操作步骤

时间:2015-01-21      阅读:437

操作步骤(仅供参考):昆虫ELISA试剂盒

切片:厚度5um

1、 取石蜡切片常规二甲苯脱蜡。

2、 系列乙醇水化。

3、 Bouin溶液放在微波炉中,中度加热30-60s后,取出放入切片处理10min。

4、 流水冲洗10min。

5、 切片试剂(A)处理5min,蒸馏水冲洗2~3次。

6、 切片置于试剂(B)中染色20min。

7、 流水冲洗2~5 min。

8、 用微波炉强火45s~60℃预热试剂(C),将切片置于试剂(C)中min。

8、 流水冲洗2~5 min。

9、 配制试剂(D),将切片置于试剂(D)中,避光染色60min。

10、流水冲洗片刻,蒸馏水冲洗2~3次,每次3~5min。

11、配制试剂(E),将切片置于试剂(E)中1min。

12、蒸馏水冲洗2~3次,每次3~5min。

13、将切片置于试剂(F)中染色5min。

14、直接转入试剂(G)中染色5min。

15、蒸馏水冲洗2~3次,每次3~5min。

16、脱水:95%乙醇1min,100%乙醇2次,每次1min。

17、将切片置于试剂(F)中染色5min。

18、100%乙醇2次,每次1min。

19、二甲苯透明,覆盖玻璃片。



染色结果:

细胞核和弹力纤维

黑色

胶原蛋白和网状纤维

黄色

蛋白聚糖

蓝色

类纤维素、纤维素

深红色

肌肉

红色

 


注意事项:

1、 弹力纤维分化常在2~3分钟内完成。

2、 流水充分冲洗以除去试剂(C)液是非常重要的。若冲洗失败会抑制后续的染色步骤。

3、 这种染色法可显示新型隐球菌,将其染成蓝色。

4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并带一次性手套操作。

储存条件:4℃,避光,6个月有效。

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