昆虫ELISA试剂盒操作步骤
时间:2015-01-21 阅读:452
操作步骤(仅供参考):昆虫ELISA试剂盒
切片:厚度5um
1、 取石蜡切片常规二甲苯脱蜡。
2、 系列乙醇水化。
3、 Bouin溶液放在微波炉中,中度加热30-60s后,取出放入切片处理10min。
4、 流水冲洗10min。
5、 切片试剂(A)处理5min,蒸馏水冲洗2~3次。
6、 切片置于试剂(B)中染色20min。
7、 流水冲洗2~5 min。
8、 用微波炉强火45s~60℃预热试剂(C),将切片置于试剂(C)中min。
8、 流水冲洗2~5 min。
9、 配制试剂(D),将切片置于试剂(D)中,避光染色60min。
10、流水冲洗片刻,蒸馏水冲洗2~3次,每次3~5min。
11、配制试剂(E),将切片置于试剂(E)中1min。
12、蒸馏水冲洗2~3次,每次3~5min。
13、将切片置于试剂(F)中染色5min。
14、直接转入试剂(G)中染色5min。
15、蒸馏水冲洗2~3次,每次3~5min。
16、脱水:95%乙醇1min,100%乙醇2次,每次1min。
17、将切片置于试剂(F)中染色5min。
18、100%乙醇2次,每次1min。
19、二甲苯透明,覆盖玻璃片。
染色结果:
细胞核和弹力纤维 | 黑色 |
胶原蛋白和网状纤维 | 黄色 |
蛋白聚糖 | 蓝色 |
类纤维素、纤维素 | 深红色 |
肌肉 | 红色 |
注意事项:
1、 弹力纤维分化常在2~3分钟内完成。
2、 流水充分冲洗以除去试剂(C)液是非常重要的。若冲洗失败会抑制后续的染色步骤。
3、 这种染色法可显示新型隐球菌,将其染成蓝色。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并带一次性手套操作。
储存条件:4℃,避光,6个月有效。