细胞：NRK-52E细胞

中文名称：大鼠肾小管上皮细胞

生长特性：贴壁细胞

培养基：1640 培养基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作）

1． 吸出原培养瓶中的培养基，PBS 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）

2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。

3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4． 注意培养基 PH 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

干细胞培育环境影响干细胞分化

在紫外光照射下，这种凝胶会软化，这使得研究能够改变底物的硬度，且无需分离及转移细胞至新环境。发现细胞在硬底物上培养一天然后恢复至软表面培养后，RUNX2会“失活”从细胞核重定位到细胞质。

（人MDA-MB-435S细胞 来源：通派细胞库 人乳癌细胞）

然而如果细胞在硬底物上培养10天再转换为软底物，之后的10天时间里RUNX2仍在细胞核中活化。当检测YAP激活时看到了相似的结果。在硬底物上度过的时间越长，细胞于软表面培养时YAP活化的时间也相应延长。

（人M14细胞 来源：通派细胞库 人黑色素瘤细胞）

研究结果还具有实用意义。如果一种体外培养过程能够无意中诱导细胞某方面活化……它们有可能不会像研究人员所猜测的那样运转。这无疑增加了我们关于体外应该如何培养干细胞的认识。

（人M4A4细胞 来源：通派细胞库 人乳癌细胞）

RUNX2、YAP以及其他的一些改变与细胞在硬材料上度过的时间相关，但这样的关联未必确定证实了这些改变的原因。