细胞：Psi2 DAP细胞

中文名称：小鼠胚胎成纤维细胞

生长特性：贴壁

培养基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

收到细胞后请尽快更换配套培养基，或自己配置的新鲜培养基（含15%血清），如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时）。

Psi2 DAP细胞传代：

1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。

2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时；

（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。

3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

研究创建了一种多能干细胞基因组编辑平台：iCRISPR，这一平台能快速，高效的敲除干细胞中的基因，而且还能在干细胞分化过程中，进行阶段特异性的基因敲除，这将在人类疾病复杂病理研究中大放异彩。

（人CAL-78细胞 来源：通派细胞库 人软骨肉瘤细胞）

人体多能干细胞(hPSCs)不仅能被用于临床的再生研究应用中，而且也能作为解析复杂性状和特征的平台，阐明其背后的基因和分子途径。开发多种遗传操控方法，但是这些方法依然存在各种问题，需要快速，具有可操控性的生物学手段。

（人RERF-LC-Ad2细胞 来源：通派细胞库 人肺腺癌细胞）

研究利用CRISPR和TALEN，这两种备受关注的基因组编辑技术，研发出了一种人类多能干细胞基因组编辑平台。研究人员将这一平台称为iCRISPR。

（小鼠Y1细胞 来源：通派细胞库 小鼠肾上腺皮质瘤细胞）

iCRISPR能用于基因功能丧失研究中，快速，高效的敲除人体多能干细胞中的等位基因，也可以针对一些精确的疾病模型，通过特定的核苷酸变换，进行多能干细胞纯合体敲除。

（人AsPC-1细胞 来源：通派细胞库 人胰腺癌细胞）

通过进一步实验，研究人员验证了双重和三重基因敲除hPSC细胞系一步法的有效性，同时也证明了在多能干细胞分化过程中能进行阶段特异性诱导基因敲除，这对于发育生物学研究来说意义重大。

（人MPanc-96细胞 来源：通派细胞库 人腺腺癌细胞）

研究指出，iCRISPR平台尤其适合用于解析人类疾病研究中的复杂遗传相互作用，以及多效性基因功能，这将有助于进行人体多能干细胞高通量遗传分析。

（人HCT-8细胞 HRT-18细胞 来源：通派细胞库 人回盲肠癌细胞）

CRISPRi，他们发现当缺失核酸内切酶活性的Cas9与一种导向RNA共表达时候，会产生一种DNA识别复合物，这种复合物能特异性干扰转录延伸，RNA聚合酶结合，或转录因子结合。

（人SK-N-BE细胞 来源：通派细胞库 人神经母细胞瘤细胞）

由此研发出这种CRISPRi系统，这一系统能有效抑制大肠杆菌中靶向基因的表达，并且不会出现脱靶效应。而且利用CRISPRi，还可以同时抑制多个靶基因，这种作用也是可逆。研究还证明，该系统也适用于哺乳动物细胞中的基因表达抑制。