人食管癌细胞 KYSE520细胞
时间:2024-06-19 阅读:110
细胞:KYSE520细胞
中文名称:人食管癌细胞
生长特性:贴壁
培养基:1640 培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
KYSE520细胞传代:
1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。
2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时;
(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。
3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
收到细胞后请尽快更换配套培养基,或自己配置的新鲜培养基(含15%血清),如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时)。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
从受精卵到成年人,人类细胞需要经历的分裂次数可以说是天文数字。每一次分裂时,母细胞都必须将DNA精确分配给两个子细胞。而着丝粒的完整性是细胞成功分裂的关键。
(大鼠GH3细胞 来源:通派细胞库 大鼠垂体瘤细胞)(人T-47D细胞 来源:通派细胞库 人乳管癌细胞)
着丝粒是染色体上的一个特殊DNA区域,是纺锤丝微管的附着之处,也是姐妹染色单体在分开前相互连接的地方。分离染色体的微管要识别着丝粒,需要该区域富含一种关键的蛋白——CENP-A。
(人SHG44细胞 来源:通派细胞库 人恶性星型胶质瘤细胞)(Jurkat细胞 来源:通派细胞库 急性T细胞白血病细胞)
在细胞进行DNA复制准备分裂的时候,需要确保新旧DNA链的着丝粒区域填充有足够的CENP-A。在此之前人们只知道着丝粒在G1期填充CENP-A,但并不了解这一过程的具体调控机制。
(小鼠LLC细胞 来源:通派细胞库 小鼠肺癌细胞)(人SK-BR-3细胞 来源:通派细胞库 人乳癌细胞)
研究发现了两种确保CENP-A正确填充的关键激酶,Plk1和CDK。这两种激酶参与了CENP-A填充的不同步骤,只有它们都正常起作用,CENP-A才能填满着丝粒中的所有空隙。
(人AU565细胞 来源:通派细胞库 人乳癌细胞)(人HMSC细胞 来源:通派细胞库 人间充干细胞)
解析这些激酶的作用途径,在此基础上干扰了CENP-A的填充时机,研究显示这种干扰会引起严重的染色体分离问题。着丝粒的功能处于严格的控制之下,因此人们一直认为CENP-A的填充时机应该很重要。
(人HPDLF细胞 来源:通派细胞库 人牙髓成纤维细胞)(人Calu-3细胞 来源:通派细胞库 人肺腺癌细胞)
CENP-A填充是着丝粒形成的核心步骤,研究揭示了这一步骤的调控基础,有助于深入理解细胞分裂的具体过程。