细胞：KELLY细胞

中文名称：人神经母细胞瘤细胞    

生长特性：贴壁

培养基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

KELLY细胞传代：

1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。

2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时；

（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。

3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

收到细胞后请尽快更换配套培养基，或自己配置的新鲜培养基（含15%血清），如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时）。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

膜蛋白对于光合作用、视觉等功能至关重要。它们还是细胞的看门人，能决定什么可能会通过细胞膜，也帮助从细胞膜外部输入养料和将内部垃圾输出。由于这些多重角色，它们构成了很大一部分的药物靶点。虽然它们的功能很明确，但是关于它们如何折叠的信息却远远落后于球状蛋白质。

（人HO-8910细胞 来源：通派细胞库 人卵巢癌细胞）（Eahy926细胞 来源：通派细胞库 肠系膜下腔动脉血管内皮细胞）

使用原始的基因组信息，来预测氨基酸链将如何通过遵循阻力最小的途径(取决于链上每个残基相关的能量)，折叠成为功能蛋白质。一个蛋白质越接近于其功能性“原始”状态，它就会越稳定。开创性理论生动地将这种能量描绘成一个漏斗。

（兔VX2细胞 来源：通派细胞库 兔肝癌细胞）（人QSG7701细胞 来源：通派细胞库 人正常肝细胞）

为了检测他们的计算机模型，研究将它们与X射线晶体学获得的真实蛋白质结构进行比较。大量的结构对球状折叠的蛋白质是可用的，这些蛋白漂浮在体内，执行生命的任务。

（人Hep2细胞 来源：通派细胞库 人喉鳞癌细胞）（人KB细胞 来源：通派细胞库 人口腔表皮样癌细胞）

很难获得跨膜蛋白的相似结构，因为要提取它们用于成像，同时又不会破坏它们，难度非常的大。研究利用一种去垢剂洗掉目的蛋白上的大多数膜，它在蛋白质周围留下一个脂肪层，但是却给出一种涂层，可使整个分子在后来形成晶格。

（人RPMI 4788细胞 来源：通派细胞库 人大肠癌细胞）（人FL细胞 来源：通派细胞库 人羊膜细胞）

联想记忆、水介导的结构和能量模型(AWSEM)，来解释膜蛋白所的外界影响，包括将部分折叠蛋白质插入膜的易位子机制和膜本身。利用这种算法，成功确定热力学漏斗在膜蛋白折叠中似乎仍然占据上风，如同它们为球状蛋白质所做的。

（人WISH细胞 来源：通派细胞库 人羊膜细胞）（人L-o2细胞  来源：通派细胞库 人正常胚胎肝细胞）

了解在它们之间转换的参数。这些参数两个残基(珠)应该相互作用的多么强烈，并考虑周围的环境。这可让我们能够从原始序列做出预测。随着越来越多的结构变得可用，研究希望调整AWSEM膜算法。

（人Chang Liver细胞 来源：通派细胞库 人chang式肝细胞）（人HL-7702细胞 来源：通派细胞库  人肝细胞）

这表明大部分的漏斗形折叠发生在蛋白质进入膜之后，很少是因为疏水性(动力学)相互作用，疏水性相互作用在球状蛋白质折叠中发挥了更大的作用。根据原始的基因组序列，相当好地预测膜蛋白结构。这对于解释新一代的实验结果将非常的有用。