细胞：HL细胞

中文名称：人胚肺二倍体细胞

生长特性：贴壁

培养基：MEM+10%FBS（GIBCO胎牛血清）

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

HL细胞传代：

1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。

2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时；

（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。

3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

收到细胞后请尽快更换配套培养基，或自己配置的新鲜培养基（含15%血清），如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时）。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

多数细胞不能分裂，除非有足够的氧气存在以支持它们的后代，但是某些癌细胞和其他细胞类型规避了这个规则。【人KHM-5M 来源：通派细胞库 人未分化甲状腺乳状癌细胞】研究人员鉴定出废除细胞警告信号的机制，使得癌细胞能够继续分裂即使在没有强大的血液供给条件下。

在这个过程中，研究人员发现溶酶体——细胞的蛋白质‘重复利用中心’——帮助控制细胞分裂的决定。【人Daoy 来源：通派细胞库 人髓母细胞瘤细胞】还发现了新的证据表明某些药物能够停止肿瘤的生长，具有高水平的蛋白HIF-1α。

低水平氧气促进HIF-1α的产生与活化，它以两种方式保护细胞。它开启一些基因产生蛋白帮助细胞适应氧气不足。【人CAL-62 来源：通派细胞库 人甲状腺未分化癌细胞】它也能停止DNA复制，防止细胞分裂并增加更多需氧细胞到一个已经很恶劣的环境中。

了解某些细胞忽略HIF-1α的警告并且继续分裂，团队寻找HIF-1α与Cdk1、Cdk2之间的关系，【人BHT101 来源：通派细胞库 人未分化甲状腺乳状癌细胞】这一蛋白已知调节细胞分裂的决定。发现HIF-1α与两者可以相互作用，但是Cdk1增加HIF-1α水平，而Cdk2减低HIF-1α水平。

怀疑Cdk1与Cdk2按照HIF-1α的指示行事通过细胞的微型“垃圾处理器”称为蛋白酶体标记或者不标记毁灭。【人B-CPAP 来源：通派细胞库 人甲状腺乳状癌细胞】但研究人员限制蛋白酶体的功能后，他们发现并没有改变HIF-1α的水平。相反，结果证明是Cdk1与Cdk2通过细胞的溶酶体标记或者不标记毁灭改变了HIF-1α水平。

值得注意的是，在某些肿瘤细胞中，【人8305C  来源：通派细胞库 人甲状腺未分化癌细胞】Cdk2能够增加HIF-1α的水平同时也刺激其基因激活作用。有效效应是细胞连续分裂同时应付低氧水平。在培养的细胞中，药物抑制Cdk1以防止HIF-1α水平的下降，并且恢复停止细胞分裂的能力，揭示它们也许能有效治疗某些肿瘤。