细胞：RPAEC细胞

中文名称：人视网膜内皮细胞

生长特性：贴壁

培养基：ECM

冻存条件：50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

RPAEC细胞传代：

1）：细胞密度约80%时，吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意根据实际情况，把握消化时间）。

2）：镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处，即可肉眼可见细胞层脱落，或吹打后镜下观察吹打处，即消化完成，否则继续消化）直接吸掉yi酶，加3~4ml 培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。

3）：取部分细胞悬液转移到新的培养皿中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。

4）：注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）

在受精过程中, 哺乳动物卵子细胞内的钙离子浓度呈现连续性反复升高. 

有证据表明: 将受精的1-和2-细胞期的胚胎细胞核移植到未受精卵中能导致卵子产生钙升高并使该重构胚激活. 

（人 Caco-2细胞 结直肠腺癌细胞）（人 Ca Ski细胞 癌细胞）

然而, 尚不清楚胚胎细胞核这种诱导卵子内钙升高的能力是如何获得的, 是否处于不同发育阶段的早期胚胎细胞核都具有这种能力. （人 D341 Med细胞髓母细胞瘤细胞）（人 DMF7细胞 肾细胞）

利用细胞核移植技术, 将小鼠受精早期胚胎细胞核移植到成熟卵母细胞中, 并测定该重构胚细胞内钙含量变化

（人 HCT-8细胞 结直肠腺癌细胞）（人 HEC-1-B细胞 子宫内膜腺癌细胞）

结果表明:受精1-和2-细胞期的细胞核具有诱导成熟卵子钙释放活性的功能, 而4-和8-细胞期细胞核、融合的2或3个4-细胞期的细胞核及乙醇孤雌活化的原核均不具有这种能力. 

（小鼠 Hepa 1-6细胞 肝癌细胞）（人 CCC-HPF-1细胞 胚肺成纤维细胞）

结果说明:胚胎细胞核诱导卵子细胞内钙升高的能力是受精过程中产生的,  它存在于早期受精胚的特殊发育阶段. 这暗示早期受精胚这的能力对胚胎的正常发育具有重要意义.