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产品名:人抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒
别名:人抑制素B(INH-B)ELISA Kit
供货商:上海远慕
产品规格:96T/48T
贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
产品用途: 仅用于科研实验,严禁用于临床诊断
样本体积: 50-100ul
检测样本: 血清、血浆细胞上清液、灌洗液。
特异性:本ELISA试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
Elisa试剂盒组织结构
1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心35分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液:1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心33分钟,取上清液。
5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
基本原理是:
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。
②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,zui后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。因此,ELISA检测是一项定位、定性和定量(敏感度可达每毫升ng~pg水平)的综合技术。常用的酶是辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AKP)。
人抑制素B(INH-B)ELISA试剂盒应用范围:
ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。
操作步骤:
1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50?l,待测样品孔中先加样品稀释液40?l,然后再加待测样品10?l(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2、温育:用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶标试剂50?l,空白孔除外。
6、显色:每孔先加入显色剂A50?l,再加入显色剂B50?l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟。
7、终止:每孔加终止液50?l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人抑制素B(INH-B)ELISA免疫试剂盒若干特点:
专一性强:抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
灵敏度高:由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
样品易保存:经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。另外我公司欢迎客户来样待测,可从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供完整的技术指导
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