上海远慕为您提供人核因子κB受体活化因子配基（RANKL）ELISA试剂盒，我司是经销生物科学领域的供货商，自公司成立以来，企业规模迅速发展中，生产加工和销售的产品包括各种化学试剂、培养基、各种ELISA试剂盒、标准品等5万余种类。在业内有*好评，咨询！

    产品名称：人核因子κB受体活化因子配基（RANKL）ELISA试剂盒

    别名：人核因子κB受体活化因子配基（RANKL）ELISA Kit

    供货商：上海远慕

    产品规格：96T/48T

    经营种类：进口分装和原装、国产。

    预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

    待检样本：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等

    特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应

    检测种属：人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。

    检测的原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）

    ELISA试剂盒包含以下各组分：

    （1）结合物及标本的稀释液；

    （2）洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水；

    （3）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

    （4）酶的底物；

    （5）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），ELISA试剂盒参考标准品和控制血清（定量测定中）；

    （6）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；

    人核因子κB受体活化因子配基（RANKL）ELISA试剂盒标本的处理：

    （1）细胞培养上清液

    根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是稀释5倍。

    （2）脑脊液

    根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是5倍。

    （3）血浆

    ①用EDTA2K离心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分钟，4℃，分离血浆样品，然后储存在零下80℃直到使用。

    ②用试剂盒中的标准稀释液5倍稀释血浆以避免血浆中的干扰物质影响检测，按照说明书方法检测。

    人核因子κB受体活化因子配基（RANKL）ELISA试剂盒操作步骤（具体操作以说明书为准）：

    实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。

    1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。

    为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

    2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃，60分钟。

    3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

    4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。

    5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

    6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

    7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

    8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

    人核因子κB受体活化因子配基（RANKL）ELISA分析检测试剂盒操作注意事项：

    1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

    2.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

    3.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

    4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

    5.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

    6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

    7.加入试剂的顺序应*，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

    8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

    9.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

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