葡聚糖凝LH-20详细说明
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上海远慕生物科技有限公司 -
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378次葡聚糖凝LH-20详细说明
中文名:葡聚糖凝LH-20
中文别名:交联葡聚糖凝胶LH-20;交联右旋糖酐凝胶LH-20
英文名称:Sephadex LH-20;Cross-inked dextran gel LH-20
供应商:上海远慕
结构成分:交联右旋糖酐
排阻极限:4~5KD(与所用溶剂有关)
颗粒直径:18~111um
球蛋白分离范围:100~4000
PH稳定性:2~11
操作温度:4~40℃
性状:白色珠粒或粉末,属亲脂性凝胶。是由葡聚糖G-25羟丙基化加工而成,属于分子筛凝胶
用途:适用于凝胶过滤,天然产物在有机溶剂中的纯化。
保存:RT
葡聚糖凝LH-20说明:
本品适合用于有机溶剂分离嗜脂性分子,天然产物在有机溶剂中的纯化。可以非常经济的大规模制备各种天然产物,尤其在中药有效成分提取中作为大孔吸附树脂解析物的纯化。
结合凝胶过滤﹑分配色谱及吸附层析于一身,能分离结构相近的分子。因此使用中要考略几种色谱的作用机制。
zui高载量可达250mg样品/ml凝胶﹑极少需要再生﹑使用得当,分离效果可保持不变。上样量视被分离物的结构性能的差异而定:差异大,则大;差异小,则小。凝胶过滤的上样量一般为5-7%的床体积,我们建议初次上样量控制在1-2%的床体积,视分离情况可以逐步增加;柱高的选择也与分离要求相关――难分物质要有一定柱高和流速控制;流动相可参考TLC的条件,正确的流动相可以提高分离度并缩短分离时间。
葡聚糖凝LH-20特点:
1、适合用有机溶剂分离嗜脂性分子,可以非常经济地大规模制备各种天然产物
2、结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身,分离结构非常相近的分子
3、载量可高达300mg样品/ml凝胶,极少需要再生,分离效果可保持十几年不变。
葡聚糖凝胶 LH-20原理:
1.葡聚糖凝胶 LH-20的分离原理主要有两方面:以凝胶过滤作用为主,兼具反相分配的作用(在反相溶剂中)。因为凝胶过滤作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脱下来,小分子的化合物保留强,zui后出柱。
2.如果使用反相溶剂洗脱, Sephadex LH-20对化合物还起反相分配的作用,所以极性大的化合物保留弱,先被洗脱下来,极性小的化合物保留强,后出柱。
3.如果使用正相溶剂洗脱,这主要靠凝胶过滤作用来分离。
1. 选择条件:
梯度洗脱在葡聚糖凝胶 LH-20使用中并不象在正相柱层析中那么重要。首先你的样品须要能溶解在尽量少量的洗脱剂中。极性大的用甲醇水系统;极性小者一般用不含水的系统。我们实验室常用正己烷二氯甲烷甲醇系统,用了很多年,效果较好。
2. 饱和层析柱:
用洗脱剂将凝胶摇匀,直立柱身,让其自然沉降,此时要防止气泡留在其中。至少半小时打开开关,流出几个柱体种的洗脱剂,目的是使其膨胀在正确比例的洗脱剂中。
3. 样品处理:
用尽量少的洗脱剂溶解样品,常压过滤。
4. 湿法上柱:
这也是要有技巧的步骤。
5. 洗脱:
控制流速,一般1drop/s以下,可参见厂家的一些参数;必要时更改极性(很多时一个极性就可以将样品洗脱完毕)。再生以备下次使用。
标签:葡聚糖凝胶 LH-20,葡聚糖凝胶