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人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒应用方法

时间:2024-11-20      阅读:1

人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒
本试剂仅供研究使用

试验原理:
CPSA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知CPSA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将CPSA物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中CPSA的活性浓度呈比例关系。

人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存)    96孔配置    48孔配置    配制
96/48份酶标板    1块板(96T)    半块板(48T)    即用型
塑料膜板盖    1块    半块    即用型
标准品:400ng/ml    1瓶(0.6ml)    1瓶(0.3ml)    按说明书进行稀稀
空白对照    1瓶(1.0ml)    1瓶(0.5ml)    即用型
标准品稀释缓冲液    1瓶(5ml)    1瓶(2.5ml)    即用型
生wu素标记的CPSA抗体    1瓶(6ml)    1瓶(3.0ml)    即用型
亲和链酶素-HRP    1瓶(10ml)    1瓶(5.0ml)    即用型
洗涤缓冲液    1瓶(20ml)    1瓶(10ml)    按说明书进行稀释
底物A    1瓶(6.0ml)    1瓶(3.0ml)    即用型
底物B    1瓶(6.0ml)    1瓶(3.0ml)    即用型
终止液    1瓶(6.0ml)    1瓶(3.0ml)    即用型

人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒自备材料
1.  蒸馏水。
2.  加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.  振荡器及磁力搅拌器等。

安全性
1.  避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.  实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.  不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒操作注意事项
1.  试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.  实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.  不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4.  使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.  使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.  洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.  底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

结果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的AIRA标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的AIRA含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-400pg/ml
4、敏感度: 1.0pg/ml

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